一 . 是非题（共16分。只需注明 “ 对 ” 或 “ 错 ” ）

• 遗传型相同的个体在不同环境条件下会有不同的表现型。

EMP 和 HMP 代谢途径往往同时存在于同一种微生物的糖代谢中。 如果碱基的置换，并不引起其编码的肽链结构的改变，那么，这种突变现象称为沉默突变。 低剂量照射紫外线，对微生物几乎没有影响，但以超过某一阈值剂量的紫外线照射，则会导致微生物的基因突变。 在宿主细胞内， DNA 病毒转录生成 mRNA ，然后以 mRNA 为模板翻译外壳蛋白、被膜蛋白及溶菌酶。 总状毛霉和米根霉同属藻状菌纲。 大多数微生物可以合成自身所需的生长因子，不必从外界摄取。 产子囊孢子的细胞一定是双倍体，而出芽生殖的细胞可以是双倍体，也可以是单倍体。 E.coli K12( l ) 表示一株带有 l 前噬菌体（ Prophage) 的大肠杆菌 K12 溶源菌株。 因为不具吸收营养的功能，所以，将根霉的根称为“假根”。 因为细菌是低等原核生物，所以，它没有有性繁殖，只具无性繁殖形式。 与单独处理相比，诱变剂的复合处理虽然不能使微生物的总突变率增大，但能使正突变率大大提高。 微生物系统分类单元从高到低依次为界、门、纲、科、目、属、种。 在自然条件下，某些病毒 DNA 侵染宿主细胞后，产生病毒后代的现象称为转染（ transfect) 。 一个操纵子中的结构基因通过转录、转译控制蛋白质的合成，而操纵基因和启动基因通过转录、转译控制结构基因的表达。 蓝细菌是一类含有叶绿素 a 、具有放氧性光合作用的原核生物。

二 填充题（共 30分）：

实验室常见的干热灭菌手段有 a 和 b 等。 实验室常用的有机氮源有 a 和 b 等，无机氮源有 c 和 d 等。为节约成本，工厂中常用 e 等作为有机氮源。 细菌的个体形态主要有 a 、 b 和 c 等。 细菌肽聚糖由 a 和 b 交替交联形成基本骨架，再由 c 交差相连，构成网状结构。 a 是芽孢所特有的化学物质。一般它随着芽孢的形成而形成，随芽孢的萌发而消失。 微生物系统命名采用 a 法，即 b 加 c 。 中体 (mesosome) 是 a 内陷而成的层状、管状或囊状结构。它主要功能 b 。 鞭毛主要化学成分为 a ，鞭毛主要功能为 b 。 荚膜的主要化学成分有 a 和 b 等，常采用 c 方法进行荚膜染色。 霉菌细胞壁化学组成是 a 等；酵母菌细胞壁化学组成是 b 和 c 等。 培养基按其制成后的物理状态可分为 a 、 b 和 c 。 枝原体突出的形态特征是 a ，所以，它对青霉素不敏感。 碳源对微生物的主要作用 a 。 Actinomycetes 是一类介于 a 和 b 之间，又更接近于 a 的原核微生物。它的菌丝因其形态和功能不同可分为 c 、 d 和 e 。 霉菌的有性繁殖是通过形成 a 、 b 和 c 三类孢子而进行的。其过程都经历 d 、 e 、 f 三阶段。大多数霉菌是 g 倍体。 分生孢子梗状如扫帚是 a 的重要分类特征。 以双层平板法测定某噬菌体效价。取 10ul 已稀释 10 6 倍的样品与 0.1ml 敏感菌株悬液和 5ml 上层培养基混匀，培养 24 小时后，平皿中出现 50 个噬菌斑。该样品噬菌体效价为 a pfu/ml 。 反转录病毒的遗传信息流向是从 a 到 b ，再到 c 。 以双链 DNA 为遗传物质的生物有 a 等；以双链 RNA 为遗传物质的生物有 b 等。 在工业发酵中常用的细菌有 a 、 b 、 c 和 d 等。 根据下图中五类对氧关系不同的微生物在半固体琼脂柱中的生长状态，分别写出它们的名称。

三 问答题（每题 6分）

1 请说明营养物浓度的变化对微生物生长速度及最终菌体产量的影响？

2 微生物的哪些形态特征可作为其分类鉴定的依据？

3 好氧微生物液体培养主要有哪些形式？它们各自有哪些用途和特点？

4 请用简图表示Hfr菌株与F � 菌株进行接合(conjugation)并形成重组子的过程。

5 请用简图说明5-溴尿嘧啶（5-BU）引起AT ? GC的碱基转换过程和基本原理。

6 根霉接合孢子的形成过程。

7 请比较青霉素和溶菌酶在制备细菌原生质体中的作用原理。

8 写出两种活菌体生长量的测定方法名称及基本操作过程。

9 恒化器培养与恒浊器培养各自有哪些特点？

一 是非题 15分

1 对

2 对

3 错

4 错

5 错

6 对

7 错

8 对

9 对

10 错

11 错

12 错

13 错

14 错

15 错

16对

二 填空题 30分

1 a,b 烘箱热空气灭菌法，火焰灼烧法。

2 蛋白胨，牛肉膏，硫酸胺，硝酸钠，豆饼粉。

3 球状、杆状、螺旋状。

4 N 乙酰胞壁酸， N 乙酰葡萄糖胺，短肽。

5 吡哆二磷酸， DPA 。

6 林奈氏双名法，属名，种名。

7 细胞质膜，生物氧化，核分裂，横隔壁，胞外酶分泌。

8 鞭毛蛋白，运动。

9 多糖，肽等，负染。

10 几丁质等。甘露聚糖，葡聚糖。

11 固体、液体和半固体。

12 无细胞壁。

13 细胞骨架和能源。

14 细菌和霉菌，细菌，基内菌丝，气生菌丝，孢子丝。

15 子囊孢子，接合孢子，卵孢子。质配，核配，减数分裂，单倍体。

16 青霉属

17 5 X10 9

18 RNA, cDNA, mRNA 。

19 大肠杆菌，呼肠孤病毒或假单胞菌的 ? 6 病毒。

20. 枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，北京棒状杆菌，产氨短杆菌，德氏乳酸杆菌，丙酮丁醇梭状芽孢杆菌。

21 微好氧菌，好氧菌，兼性厌氧菌，耐氧菌，厌氧菌。

三 问答题

• 在营养物浓度很低的情况下，营养物的浓度影响细菌的生长速率。随着营养物浓度的逐步增高，营养物浓度不影响生长速率，但影响最终的菌体产量。如果进一步提高营养物浓度，营养物浓度不影响生长速率，不影响最终菌体生成量。

细胞大小、形态；繁殖体在胞内的位置，形态及数量；鞭毛线毛的位置和数量；内含物的种类；细胞器的结构、数量；菌落形状、大小、色泽、硬度、光滑度等；菌丝的有无分隔；分生孢子梗，孢子囊等形态结构；病毒的噬菌斑、包含体，头部、尾部结构； 在实验室中常用：

• 试管液体培养：此法的通气效果一般较差。仅适用于进行微生物的各种生理生化试验。

摇瓶培养 将装有液体培养基的三角瓶（摇瓶），上盖 8-12 层纱布或用疏松的棉塞塞住以阻止空气中杂菌或杂质进入瓶内，而空气可以透过阻隔供菌呼吸之用。将摇瓶放在摇瓶机（摇床）上以一定速度保温振荡培养。摇瓶培养不仅操作简便，而且可以将许多摇瓶（在大摇床上可多达上百个）同时在相同的温度和振荡速度等条件下进行培养试验。摇瓶培养在实验室里被广泛用于微生物的生理生化试验、发酵和菌种筛选等，也常在发酵生产中用于种子培养。 (3) 台式发酵罐 实验室用的发酵罐体积一般为几升到几十升。一般都有多种自动控制和记录装置。如配置有 pH 、溶解氧、温度和泡沫检测电极，有加热或冷却装置，有补料、消泡和 pH 调节用的酸或碱储罐及其自动传送装置。因为它的结构与生产用的大型发酵罐接近，所以，它是实验室模拟生产实践的试验工具。

在生产中常用：

• 浅盘培养 (shallow pan culture) 容器中盛装浅层液体静止培养，没有通气搅拌设备，全靠液体表面与空气接触进行氧气交换。这是最为原始的液体培养形式。

发酵罐深层培养 液体深层培养的主体设备是发酵罐。发酵罐可以为微生物提供丰富而均匀的营养，良好的通气搅拌，适宜的温度和酸碱度，并能防止杂菌污染。为此，它配备有培养基配制系统、蒸汽灭菌系统、空气压缩过滤系统和补料系统。生产效率较高，易于控制，产品质量稳定，因而在发酵工业中被广泛应用。但是，深层培养耗费的动力较多，设备较为复杂，需要较大的投资。

• 青霉素是肽聚糖单 体五肽末端的 D- 丙氨酰 -D- 丙氨酸的结构类似物，它们相互竞争转肽酶的活性中心。当转肽酶与青霉素结合后，因前后两个肽聚糖单体间的肽桥无法交联，因而只能合成缺乏正常机械强度的缺损肽聚糖，从而形成细胞壁缺损的细胞。因为它是抑制肽聚糖的合成，因此对生长旺盛的微生物具有明显的抑制作用，而对生长休止状态的细胞，则无作用；溶菌酶广泛存在于卵清、人的泪液和鼻涕、部分细菌和噬菌体中，它能有效地水解细菌的肽聚糖，其作用部位就是 N- 乙酰胞壁酸的 1 位碳和 N- 乙酰葡萄糖胺的 4 位碳之间的 Alpha-1,4 糖苷键。它对生长期和休止期的细胞均有作用。

a. 液体稀释法 对未知菌样作连续的 10 倍系列稀释。根据估计数，从最适宜的 3 个连续的 10 倍稀释液中各取 5ml 试样，接种到 3 组共 15 支装有培养液的试管中（每管接入 1ml ）。经培养后，记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查 MPN(most probable number ) 表，再根据样品的稀释倍数就可计算出其中活菌含量。

b. 平皿菌落计数法 将发酵液稀释后涂布在固体培养基表面，也可将熔化后冷却至 45-50 ℃的固体培养基与一定稀释度的菌悬液混合，凝固后培养适当时间，测定菌落形成单位的数目。不同菌种的菌落大小不同，一般控制在 9 厘米培养皿中生长 50-500 个菌落为佳。该法可以反映样品中活菌的数量。较适合于细菌和酵母菌，不适于霉菌。有人将培养基放在固定于载玻片上的小环中，将细胞接种到这微型平板上，经短时间培养后，将其移到显微镜下观测菌落数目。与以上平皿计数法相比，它能更快速获得结果。

c.细胞组分 ATP 定量法 ATP 在一定的微生物细胞中含量很稳定，一般是 10 -6 M 数量级。典型细菌细胞的 ATP 含量为每克细胞干重含有 1 毫克 ATP 。因为细胞死亡几分钟内， ATP 就会被水解，所以，以 ATP 为指标，可以快速、灵敏地反映活菌体数量。 ATP 测定可以利用萤光素酶催化的生物发光反应。

9 恒化培养与恒浊培养的比较

装置	控制对象	生长限制因子	培养液流速	生长速度	产物	应用范围
恒化器	培养液流速	有	恒定	低于最高生长速度	不同生长速度的菌体	实验室为主
恒浊器	菌液密度	无	不恒定	最高生长速度	大量菌体或与菌体生长平行的代谢产物	生产为主