四、判断题
1、端粒酶以端粒DNA为模板复制出更多的端粒重复单元，以保证染色体末端的稳定性。（ x  ）
2、核纤层蛋白B受体（lamin B receptor, LBR）是内核膜上特有蛋白之一。（  对  ）
3、常染色质在间期核内折叠压缩程度低，处于伸展状态（典型包装率750倍）包含单一序列DNA和中度重复序列DNA（如组蛋白基因和tRNA基因）。（  对  ）
4、核被膜由内外两层单位膜组成，面向胞质的一层为核内膜，面向核质的一层为核外膜。（  x   ）
5、在细胞周期中核被膜的去组装是随机的，具有区域特异性。（   x ）
6、现在认为gp210的作用主要是将核孔复合物锚定在孔膜区。（对）
五、简答题
1、简述细胞核的基本结构及其主要功能。
、细胞核是真核细胞内最大、最重要的细胞器，主要由核被膜、染色质、核仁及由非组蛋白质组成的网络状的核基质组成，是遗传信息的贮存场所，是细胞内基因复制和RNA转录的中心，是细胞生命活动的调控中心
2、简述染色质的类型及其特征。
间期染色质按其形态特征和染色性能区分为两种类型：常染色质和染色质染色质。常染色质纤维折叠压缩程度低,处于伸展状态,用碱性染料染色时着色浅。构成常染色质的DNA主要是单一序列DNA和中度重复序列DNA。异染色质纤维折叠压缩程度高, 处于聚缩状态，用碱性染料染色时着色较深，又分结构异染色质或组成型异染色质和兼性异染色质。
3、简述核仁的结构及其功能。
在光学显微镜下，核仁通常是匀质的球形小体，一般有1-2个，但也有多个。主要含蛋白质，是真核细胞间期核中最明显的结构，在电镜下显示出的核仁超微结构与胞质中大多数细胞器不同，在核仁周围没有界膜包围，可识别出3个特征性区域：纤维中心、致密纤维组分、颗粒组分。功能是进行核蛋白体的生物发生的重要场所，即核仁是进行rRNA的合成、加工和核蛋白体亚单位的装配的重要场所。
4、简述核被膜的主要生理功能。
构成核、质之间的天然屏障，避免生命活动的彼此干扰；
保护核DNA分子不受细胞骨架运动所产生的机械力的损伤；
核质之间物质与信息的交流；
为染色体定位提供支架。
5、组蛋白如何参与表观遗传调控？
组蛋白修饰主要包括甲基化、乙酰化、磷酸化等。 其参与调控的方式主要包括：1，改变空间结构，因为基因平时是以染色体形式存在的，在转录时需要通过组蛋白的改变打开，放转录因子进入。2，作用于特定转录元件。3，和DNA甲基化进行相互作用，来调控表达变化。
六、论述题
1、试述核孔复合体的结构及其功能。
核孔复合体主要有下列结构组分：
①、胞质环
位于核孔边缘的胞质面一侧，又称外环，环上有8条短纤维对称分布伸向胞质；
②、核质环
位于核孔边缘的核质面（又称内环），环上8条纤维伸向核内，并且在纤维末端形成一个小环，使核质环形成类似“捕鱼笼”（fish-trap）的核篮（nuclear basket）结构；
③、辐
由核孔边缘伸向核孔中央，呈辐射状八重对称，该结构连接内、外环并在发挥支撑及形成核质间物质交换通道等方面起作用；它的结构比较复杂，可进一步分为三个结构域：⑴柱状亚单位：主要的区域，位于核孔边缘，连接内、外环，起支撑作用；⑵腔内亚单位：柱状亚单位以外，接触核膜部分的区域，穿过核膜伸入双层核膜的膜间腔；⑶环带亚单位：在柱状亚单位之内，靠近核孔复合体中心的部分，由8个颗粒状结构环绕形成核孔复合体核质交换的通道。
④、中央栓
位于核孔的中心，呈颗粒状或棒状，又称为中央颗粒，由于推测它在核质交换中起一定的作用，所以又把它称做转运器（transporter）
核孔复合体是一种特殊的跨膜运输蛋白复合体，并且是一个双功能、双向性的亲水性核质交换通道，双功能表现在它有两种运输方式：被动扩散与主动运输；双向性表现在既介导蛋白质的入核转运，又介导RNA、核糖核蛋白颗粒（RNP）的出核转运。
2、试述核小体的结构要点及其实验证据。
结构要点：⑴每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体及一个分子H1。
⑵、组蛋白八聚体构成核小体的盘状核心结构，由4个异二聚体组成，包括两个H2A-H2B和两个H3-H4。两个H3-H4形成4聚体位于核心颗粒中央，两个H2A-H2B二聚体分别位于4聚体两侧。每个异二聚体通过离子键和氢键结合约30bp DNA。
⑶、146bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈, 组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bp DNA，锁住核小体DNA的进出端，起稳定核小体的作用。包括组蛋白H1和166bp DNA的核小体结构又称染色质小体。
⑷、两个相邻核小体之间以连接DNA 相连，典型长度60bp，不同物种变化值为0～80bp。
实验证据：
a、用温和的方法裂解细胞核，铺展染色质，电镜观察
未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝，经盐溶液处理后解聚的染色质呈现10nm串珠状结构。
b、用非特异性微球菌核酸酶消化染色质，经过蔗糖梯度离心及琼脂糖凝胶电泳分析，发现绝大多数DNA被降解成约200bp的片段；部分酶解，则得到的片段是以200bp不单位的单体、二体（400bp）、三体（600bp）等等。如果用同样的方法处理裸露的DNA，则产生随机大小的片段群体，由此显示染色体DNA除某些周期性位点之外，均受到某种结构的保护，避免酶的接近。
c、应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重建技术研究，发现核小体颗粒是直径为11nm、高6.0nm的扁园柱体，具有二分对称性，核心组蛋白的构成是先形成（H3）2•（H4）2四聚体，然后再与两个H2A•H2B异二聚体结合形成八聚体。
d、SV40微小染色体（minichromosome）分析与电镜观察：用SV40病毒感染细胞，病毒DNA进入细胞后，与宿主的组蛋白结合，形成串珠状微小染色体，电镜观察到SV40DNA为环状，周长为1500nm，约含5.0kb。若200bp相当于一个核小体，则可形成25个核小体，实际观察到23个，与推断基本一致。
3、试述从DNA到染色体的包装过程（多级螺旋模型）。
、 a、由DNA与组蛋白包装成核小体，在组蛋白H1的介导下核小体彼此连接形成直径约10nm的核小体串珠结构，这是染色质包装的一级结构；b、在有组蛋白H1存在的情况下，由直径10nm的核小体串珠结构螺旋盘绕，每圈6个核小体，形成外径30nm，内径10nm，螺距11nm的螺线管。螺线管是染色质包装的二级结构。C、螺线管进一步螺旋化形成直径为0.4um的圆筒状结构，称为超螺线管，这是染色质包装的三级结构。d、超螺线管进一步折叠、压缩，形成长2-10um的染色单体，即四级结构。
 
压缩7倍 b 压缩6倍 压缩40倍 压缩5倍
DNA 核小体 螺线管 超螺线管 染色单体
（200bp长约70nm） （直径约10nm） （直径30nm，螺距11nm） （直径400nm长11～60um）（长2～10um）
4、核孔复合物的主动运输具有严格的双向选择性，这种选择性表现在哪些方面？
其主动运输的选择性表现在以下三个方面：⑴对运输颗粒大小的限制；主动运输的功能直径比被动运输大，约10～20nm，甚至可达26nm，像核糖体亚单位那样大的RNP颗粒也可以通过核孔复合体从核内运输到细胞质中，表明核孔复合体的有效直径的大小是可被调节的；⑵通过核孔复合体的主动运输是一个信号识别与载体介导的过程，需要消耗ATP能量，并表现出饱和动力学特征；⑶通过核孔复合体的主动运输具有双向性，即核输入与核输出，它既能把复制、转录、染色体构建和核糖体亚单位装配等所需要的各种因子如DNA聚合酶、RNA聚合酶、组蛋白、核糖体蛋白等运输到核内，同时又能将翻译所需的RNA、装配好的核糖体亚单位从核内运送到细胞质。有些蛋白质或RNA分子甚至两次或多次穿越核孔复合体，如核糖体蛋白、snRNA等。
第十二章    细胞增殖及其调控
一、名词解释     
1、细胞周期：连续分裂的细胞，从上一次有丝分裂结束开始到下一次有丝分裂结束所经历的整个过程。在这个过程中，细胞遗传物质复制，各组分加倍，平均分配到两个子细胞中。
2、细胞周期检验点：在细胞内存在一系列的监控机制，可以鉴别细胞周期进程中的错误，并诱导产生特异的抑制因子，阻止细胞周期的进行，这些监控机制称为检验点。不仅存在于G1期，也存在于细胞周期的其他时期。
3、细胞同步化：在自然过程中发生的或因研究工作的需要，为得到具有分裂能力且细胞时相一致的细胞群体的方法。
4、染色体的早期凝集：将细胞同步化在细胞周期的不同时期，通过细胞融合，将M期细胞与其他间期细胞融合后培养一段时间，与M期细胞融合的间期细胞发生了形态各异的染色体凝集现象。
5、MPF（细胞促分裂因子）：又称促成熟因子或M期促进因子，是指存在于成熟卵细胞的细胞质中，可以诱导卵细胞成熟的一种活性物质。已经证明，MPF是一种蛋白激酶，包括两个亚基即Cdc2蛋白和周期蛋白，当二者结合后表现出蛋白激酶活性，可以使多种蛋白质底物磷酸化；MPF是一种普遍存在的、进化上较保守的G2/M转换调控者。
6、周期中细胞：又称周期细胞或连续分裂的细胞，是指在细胞周期中连续运转不断分裂，保持分裂能力的细胞。
7、静止期细胞：又称G0期细胞或静止期细胞，是指暂时脱离细胞周期不进行增殖，但在适当的刺激下，可重新进入细胞周期的细胞。
8、细胞周期蛋白：与细胞周期调控有关的、其含量随细胞周期进程变化而变化的特殊蛋白质。最初在海胆卵中发现，一般在细胞间期内积累，在细胞分裂期内消失，在下一个细胞周期又重复这一消长现象，即在每一轮间期合成，G2/M时达到高峰，M期结束时被水解，下一轮周期又重新合成积累。已经证明周期蛋白广泛存在于各种真核生物中，是诱导细胞进入M期必需的，说明周期蛋白是细胞周期的调控者，可能参与了MPF功能的调节，是MPF的一部分。 13、细胞分裂周期基因：是指与细胞分裂和细胞周期有关的基因，称为cdc基因。
9、细胞分裂周期基因
10、CDK抑制因子（CKI）：是细胞内存在的一些对CDK激酶活性起负调作用的蛋白质。它是能与CDK激酶结合并抑制其活性的一类蛋白质，具有确保细胞周期高度时序性的功能，在细胞周期的负调控过程中起着重要作用。
11、周期蛋白依赖性激酶（CDK）：是与细胞周期进程相对应的一套Ser/Thr激酶系统。各种CDK沿细胞周期时相交替活化，磷酸化相应底物，使细胞周期事件有条不紊地进行下去。
12、DNA合成阻断法：通过使用DNA合成抑制剂，特异性地抑制DNA的合成，将细胞阻断在G1/S交界处的细胞同步化方法。
13、中期阻断法：经过药物处理，抑制微管的形成，从而抑制有丝分裂器的形成，将细胞阻断在细胞分裂中期的同步化方法。
14、终端分化细胞：又称不分裂细胞，是指不可逆地脱离细胞周期、丧失增殖能力并保持一定生理机能的细胞。
15、 视网膜细胞瘤蛋白    是周期蛋白/CDK复合物的底物和G1—S时相转变调节因子，在细胞通过G1期限制点起作用。
16、 转录因子E2F    它调控的基因有周期蛋白E和A，它们与CDK2结合复合物是使细胞从G1进入S期转变所必须的。 
17、 p53：肿瘤抑制基因，在DNA受到损伤时，它通过激活和抑制基因的转录，而起着阻断细胞周期和诱导细胞凋亡的作用。。
二、填空题
1、细胞周期可分为四个时期即 G1期  、 S期  、 G2期  和  M期   。
2、最重要的人工细胞周期同步化的方法有 DNA合成阻断  法和  中断阻断 法。
3、按照细胞增殖能力不同，可将细胞分为三类即 周期细胞、休眠细胞 和 终端分化细胞。
4、在细胞周期调控中，调控细胞越过G2/M期限制点的CDK与周期蛋白的复合物称为 MPF 。
5、以培养细胞为材料，通过有丝分裂选择法可以获得M期的细胞，这是因为培养的细胞在M期时  细胞变圆，与培养瓶的附着力减弱  。
6、MPF由两个亚单位组成，即 Cdc2 和  周期蛋白 。当两者结合后表现出蛋白激酶活性，其中Cdc2 为催化亚单位，  周期蛋白 为调节亚单位。
7、肝细胞和肌细胞属于不同细胞周期类型，肝细胞在受到损伤情况下能进行分裂，而肌细胞却不行，由此可判断肝细胞属于 休眠细胞，而肌细胞属于 终端分化细胞 。