2003年硕士学研究生入学考试试题及答案
一， 名词解释
1 stationary phase of bacterical growth curve：细菌生处长曲线的稳定期，典型生长曲线分为延滞期、指数期、稳定期和衰亡期 4 个时期。稳定期就是由于代谢产物积累等原因，菌体生长速度下降与死亡速度相等，菌体量达到最大的动态平衡时期。
2 selective medium：选择培养基，一类根据某微生物的特殊营养要求或其对化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。
3 半保留复制模型：即DNA复制时以两条单链为模板分别合成前导链和后滞链，以新合成的DNA 单链和原DNA 单链构成新的双链DNA，成为半保留复制。
4血球计数板：血球计数板是一块特制的厚型载玻片，用于对细胞、部分细菌、真菌、酵母等微生物进行计数。载玻片上有四个槽构成三个平台。中间平台较宽，其中间又被一短横槽分成两半，每个半边分别刻一方格网，每个方格共分9个大方格，中央一个大方格作为技数区。计数区分为16×25和25×16两种类型。
5 移码突变：指在DNA上某个位置插入或缺失一个或几个碱基对（非3的倍数），此位置之后一系列遗传密码子的阅读框发生移位错误的突变。
6 无氧呼吸：又称厌氧呼吸，指一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物（少数为有机氧化物）的生物氧化，这是一类在无氧条件下进行的、产能效率较低的特殊呼吸。 7 天然培养基：指一类利用动植物或微生物体包括其提取物制成的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富，并且难以说出其确切化学组成的培养基。
8 原生质体融合：指利用聚乙二醇或电脉冲等方式，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。
9 巴斯德消毒法：这是一种用于牛奶、啤酒、酱油等不宜进行高温灭菌的液态食品或调料进行的低温消毒方法。分为低温维持法和高温瞬时法，前者指在在63°C下维持30min，后者指在72°C的较高温度下维持15s。
10 经典分类法：指在微生物鉴定工作中，利用形态特征如细胞形态、大小、菌落形态，生理生化反应，生态特征，血清学反应等表型为指标进行分类鉴定的方法。 二、问答
1 水对微生物的生命活动有什么重要意义？在工业发酵中如何利用这一性质（举两例说明）
答：意义：①水是细胞的优良溶剂，，几乎保证一切生化反应的的进行②水可以参与某些重要的生化反应③水可维持各种生物大分子结构的稳定性④水的高比热等优良的物理性质对微生物生命活动十分重要，如可以调节和控制细胞温度。
应用：①在发酵生产中调节合理的水活度，使微生物能够更好地进行生长，得到更多的发酵产物。②降低产品中的水活度，使微生物难以生长，进行发酵食品的贮存，如酱。 
2紫外线诱变的机理及操作过程并说明各环节的注意点和原因
答：机理：紫外线的作用光谱与核酸的吸收光谱一致，所以DNA最易受到紫外线的影响。由于DNA强烈吸收紫外线，尤其是碱基引起DNA的变化。其变化形式有很多，如DNA链的断裂，DNA分子内和分子间交联，核酸与蛋白质交联及嘧啶产生水合物和二聚体，其中主要为二聚体，造成局部DNA无法正常配对，因此复制时易产生错误碱基，导致突变。
操作过程：①将细菌培养液以3000r／min离心5min，倾去上清液，将菌体打散加入无菌生理盐水再离心洗涤。②将菌悬液放入一巳灭菌的，装有玻璃珠的三角瓶内用手摇动，以打散菌体。将菌液倒入有定性滤纸的漏斗内过滤，单细胞滤液装入试管内，一般处于浑浊态的细胞液含细胞数可达108个／ml左右，作为待处理菌悬液。③取2～4m1制备的菌液加到直径9cm培养皿内，放入一无菌磁力搅拌子，然后置磁力搅拌器上、15W紫外线下30cm处。在正式照射前，应先开紫外线10min，让紫外灯预热，然后开启皿盖正式在搅拌下照射10～50s。操作均应在红灯下进行，或用黑纸包住，避免白炽光。④取未照射的制备菌液和照射菌液各o.5ml进行稀释分离，计数活菌细胞数。⑤取照射菌液2ml于液体培养基中(300ml三角瓶内装30ml培养液)，120r／min振荡培养4～6h。⑥取中间培养液稀释分离、培养。⑦挑取菌落进行筛选。
注意点：①一定要制备合适浓度的菌悬液，才能使照射剂量足够且照射均匀②培养皿中的菌悬液厚度要适中，这样紫外线才能充分照射菌悬液③照射紫外后的筛选等操作过程均需要在避光或红光下进行，避免光复活。 
3转导育种的原理是什么？如何进行
答：原理：以缺陷噬菌体，将供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中进行交换与整合，使后者后的前者部分遗传性状的现象称为转导，分为普遍转导和局限转导。普遍转导是少数完全缺陷噬菌体对供体基因组上任何片段的“误包”造成的；局限转导是由部分缺陷的温和噬菌体将少数特定基因携带到受体中造成的，如误切。
操作：①供体菌（对数生长期）+噬菌体——>培养——>氯仿（杀死供体菌）——>低速离心除菌，上清液经DNA酶处理，微孔滤膜除菌+受体菌，低速离心收集菌体，选择培养基，重组子 务必使感染复数小于1 
4发酵工厂废弃物如何处理？提出两个微生物方案对啤酒厂废弃物进行处理
提示：将啤酒废酵母泥干燥后作蛋白饲料添加剂或者生产酵母精膏用作发酵工业的培养基。
利用黑曲霉将啤酒糟进行再发酵生产高蛋白饲料。