二、选择题
1、A；2、C 钙调蛋白的发现，使得钙离子被确认为是一种细胞信号传导的载体，又被称为细胞信号载体；3、B；4、B；5、C；6、C；7、D；8、A；9、B；10、B；11、C；12、C；13、A；14、C；15、C 分别是氨基酸、ATP、tRNA；16、C；17、A  DNA聚合酶δ具有细胞核合成DNA链的能力，但必须在由DNA聚合酶α形成引物后形成；18、C；19、C；20、A
三、填空题
1、重链，轻链，二硫键，2；2、甲硫氨酸，N-甲酰甲硫氨酸；3、超二级结构，结构域；4、O-糖苷键，N-糖苷键；5、GTP水解酶；6、脲；7、6-磷酸果糖-1-激酶，增加；8、比活提高的倍数，活性回收率的高低；9、7次跨膜结构；10、二酰基甘油，磷酸碱基；11、磷脂，蛋白质；12、2nm，0.34nm；13、GCC，GCU；14、5’，T4RNA连接酶，pCp/胞苷3’，5’-二磷酸；15、解链，断链；16、校正，校正；17、磷酸核糖焦磷酸/PRPP；18、吡哆醇，吡哆醛，吡哆胺；19、组蛋白，核小体；20、硫氧还蛋白，硫氧还蛋白还原酶
四、问答题
1、打开二硫键最正常用的方法是使用巯基试剂。如巯基乙醇，可是参与二硫键的2个半胱氨酸还原酶带有游离巯基的半胱氨酸。为了使还原反应顺利进行，通常加入高浓度的尿素等变性剂。加入过量的还原剂可以防止还原所得的巯基被重新氧化。如果不准备使肽链重新氧化，而是进一步进行化学结构的研究，可以将巯基转化为其他的修饰形式，例如和羧甲基化等烷化剂反应，另外还有甲酸氧化法和亚硫酸还原法等。
2、ES复合物的形成速度为：d[ES] /dt=K1（[E]－[ES]）×[S]
ES复合物的分解速度为：-d[ES] /dt=K2[E]+K-1[ES]
在稳态条件下，ES复合物的形成速度等于分解速度：K1（[E]－[ES]）×[S]=K2[E]+K-1[ES]
即（[E]－[ES]）×[S]/ [ES] =（K2+K-1）/K1
若（K2+K-1）/K1=Km    即[ES] =[E] [S]/（Km+[S]）①
酶反应速度 v=K2[ES]    酶被底物饱和时[E]=[ES]   酶反应速度Vmax=K2[ES]=K2[E]②
由①②可得 v/Vmax=[S]/(Km+[S])
3、RNA主要包括r RNA ：作为装配者并具有催化作用；t RNA ：作为转换器，携带氨基酸并具有解译作用；m RNA ：作为信使，携带DNA的遗传信息并在蛋白质合成中作为模板。此外还包括反义RNA 。核酶等。总结可知RNA 有五大类功能：①控制蛋白质的合成②作用于RNA转录后加工修饰③基因表达与细胞功能的调节④生物催化与其他细胞持家功能⑤遗传信息的加工与进化。
4、乳糖操纵子由调节基因（R）、启动子（P）、操纵基因（O）和三个代谢乳糖的酶的结构基因：lacZ、lacY、lacA组成。lacZ编码β-半乳糖苷酶，lacY编码β-半乳糖苷通透酶，lacA编码β-半乳糖苷转乙酰酶。在有葡萄糖的情况下，细菌不利用乳糖，此时，调节基因（R）表达的阻遏蛋白能与操纵基因（O）结合，阻断识别启动子（P）的RNA聚合酶通过操纵基因（O）而转录结构基因；葡萄糖耗尽时，乳糖被利用，此时乳糖可与阻遏蛋白形成复合物，RNA聚合酶于是能通过操纵基因（O）转录得到三个酶，其中，乳糖是诱导物，产物叫诱导酶。

中科院1998生化与分子
一、是非题：12题，共12分。
1、糖蛋白中的糖肽连接键，是一种共价键，简称为糖肽键。 （ ）
2、电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同，即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法。（ ）
3、激素按其化学本质来说是有特定生理功能的多肽或蛋白质（ ）
4、激素是通过膜受体引发生物效应的。（ ）
5、真核细胞所有的细胞色素氧化酶都位于线粒体内膜上。（ ）
6、蛋白质生物合成之后的共价修饰，都属于不可逆的化学修饰。（ ）
7、核糖上被甲基化的胞嘧啶核苷被表示为Cm。（ ）
8、DNA固相机器合成时用的活化单体是dNTP。（）
9、tRNA只在蛋白质生物合成中起作用。（ ）
10、起转录调控作用的DNA元件都能结合蛋白质因子。（ ）
11、完成了水稻基因组物理图谱就可以宣布水稻遗传信息之谜破译了。（ ）
12、人休需要的烟酰胺可以由色氨酸来合成，因此在营养上色氨酸可以替代烟酰胺。（ ）
二、选择题：20题，每题1分，共20分。选择答案的号码必须填入（ ）中，答错不倒扣。
1、蛋白质在下列哪一种水解过程中，由于多数氨基酸被遭到不同程度的破坏，产生消旋现象。（）         
①酸水解；         ②酶水解；            ③碱水解；
2、胰岛素和表皮生长因子的受体实际上是一种酶，它们是：（ ）
①磷酸化酶； ②蛋白水解酶； ③酪氨酸激酶
3、要断裂由甲硫氨酸残基的羧基参加形成的肽键，可用：（ ）
①胰蛋白酶； ②尿素； ③溴化氢；
4、在测定蛋白质一级结构时，为了对二硫键进行定位，需将含二硫键的肽段分离，此时可用下列哪种方法。            
①过甲酸氧化； ②对角线电泳； ③硫基化合物还原。
5、下列哪一种是目前研究蛋白质分子空间结构最常用的方法 
①X光衍射法；②圆二色性；③荧光光谱
6、如果某个单底物酶促反应是二级反应， E+S  Kcat  ES→P
那么决定其催化反应速度的常数是：（）   
①Km;     ②Ks;      ③Kcat;     ④Kcat/Km。
7、酶促反应降低反应活化能的能量来源于：（ ）
①底物化学链的断裂可释放的化学能； ②酶与底物结合能；③底物形变能；④酶构象变化所释放的能量。
8、某个非底物抑制的酶，在实验上除无法测定初速度以外，造成Michacl- Menten方程失效原因是：（）
①别构酶； ②底物对酸激活作用；③一定浓度范围内产物抑制作用。
9、以NADP+作为氢受体形成NADPH的代谢途径是：（）
①糖酵解； ②三羧酸循环；③ 磷酸戊糖途径； ④糖元异生
10、氧化磷酸化作用（oxidative phosphorylation）是指将生物氧化过程释计的自由能转移并生成：（）
①NADPH; ②NADH; ③ATP; ④FADH。
11、转录真核生物t RNA的酶是：（）
①RNA聚合酶I；②RNA聚合酶II；③RNA聚合酶III；④反转录酶。
12、嘌呤霉素抑制蛋白质生物合成是由于它是：（ ）
①核糖体失活蛋白；②核糖核酸酶；③氨酰tRNA的类似物；④RNA聚合酶的抑制剂。
13、为核糖体上的蛋白质生物合成提供能量的分子是：  
①ATP； ②GTP； ③UTP； ④CTP。
14、真核生物5S RNA 基因的启动子在转录区结构基因的： 
①上游； ②内部； ③下游。
15、大肠杆菌中主要行使复制功能的酶是：
①DNA聚合酶I②DNA聚合酶II③DNA聚合酶III④Klenow酶
16、尿素合成的中间物氨基甲酰磷酸是在什么中合成的：  
①胞液；②内质网；③线粒体；④细胞核。
17、逆转录酶具有结合什么的活性，并以它为引物合成DNA链。
①MRNA;          ②TRNA;         ③核内小分子RNA；       ④tRNA.
18、RNaseH能特异的切割为：
① 双链DNA；②双链RNA；③RNA-DNA杂合分子中的DNA；④RNA-DNA杂合分子中的RNA。
19、酵解的速度决定于：    
①磷酸葡萄糖变位酶；②磷酸果糖激酶；③醛缩酶；④磷酸甘油激酶。
20、测定蛋白质在DNA上的结合部位常用什么方法：
①Western blotting;     ②PCR;        ③限制性图谱分析；     ④DNase I保护足印分析。
三、填空题：17题共40空格，第空格答对给1分，共40分。
1、已知蛋白质存在的超二级结构有三种基本组合形式_________、______、_________。
2、免疫球蛋白G在用___处理时可产生Fab片段，而用___处理时，可产生（Gab’）2片段。
3、因为_________、_________和_________等三种氨基酸残基的侧链基团在紫外区具有光吸收能力，所以在_______________nm波长的紫外光吸收常被用来定性或定量检测蛋白质。
4、当蛋白质和配基结合后，改变了该蛋白质的构象，从而改变该蛋白质的生物活性的现象称为_____。
5、一氧化氮（NO）是最上的信使分子之一，它主要功能是____________________。
6、膜蛋白跨膜部份的结构（构象）大多数是________________________。
7、除了膜脂肪酰链的长度以外，影响膜流动性的主要因素是_________________。
8、同一种神经介质作用于不同靶细胞引起截然相反的作用，是因为靶细胞上________不同。
9、内质网(endoplasmicreticulum)有Ca2+的储存器，_________作为信使分子可以促成Ca2+的释放。
10、现已发现上百种基因调节蛋白（gene regulatory Proteins），但它们识别双螺旋DNA特顺序的结构基元（structural motifs）仅发现有限几种，请写出_________、______、______________和___   。
11、真核生物t RNA的加工，成熟过程包括：__________，______，_______、___________和____     。
12、sn RNA主要参于__________的加工成熟，sn RNA主要参于______________的加工成熟。
13、核糖体失活蛋白有两类，它们分别具有位点专一性的____________和____________活性。
14、现在普遍认为核糖体上存在_____________个tRNA结合位点。
15、与正确和有效翻译作用相关的m RNA结构元件有___________、________和__________。
16、在糖异生作用中由丙酮酸生成磷酸烯醇式丙酮酸，第一步反应生成草酰乙酸是_______酶催化的，同时要消耗_____；第二步反应是_______酶催化的，同时消耗___________。
17、含有腺苷酸的辅酶有______________、_______________和______________等多种。
四、问答题：4题，每题7分，共28分。
1、简述1997年获诺贝尔医学及生理学奖的美国科学家S. Prusiner的主要贡献。
2、真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是？           
3、一DNA模板的初始转录物经T1酶完全水解得两组分。一组分经RnaseA完全作用得过且过pppUp、Up、ApGp。另一组分经RnaseA完全作用得Cp和ApU。同样模板分别经含-32p-GTP（A）和-32p-GTP（B）的NTP转录，并分别经修饰酶修饰后，经Rnase T2酶解，转录物A得I32P，转录物B得m1I32P的放射性产物，请说出：（1）该DNA模板的序列和RNA转录物的序物；（2）该片段经修饰后的修饰核苷酸数量，修饰核苷种类及位置；（3）推测的过程。
4、简述乙酰辅酶A在碳化合物代谢中的作用。
中科院1998年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、+；2、+；3、- 除了肽类激素外，还有固醇类激素；4、+；5、+；6、- 磷酸化、ADP核糖基化和细胞质内的单个O-GlcNAc 修饰均是可逆的；7、+；8、- 有机合成用不是dNTP，而是活化dNMP DNA酶促合成的原材料是dNTP；9、-；10、+；11、-；12、+
二、选择题
1、C；2、C；3、C；4、B；5、A；6、D；7、B；8、B；9、C；10、C；11、C 真核生物RNA聚合酶Ⅲ又叫小分子RNA聚合酶，负责包括tRNA和5SrRNA在内的小分子RNA的合成；12、C；13、B 蛋白质起始物生成除需要GTP提供能量外，还需要Mg2+、NH4+及三个起始因子（IF1、IF2、IF3）在起始tRNA中。14、C；15、C；16、C；17、B；18、D；19、B；20、D
三、填空题
1、αα，βαβ，βββ；2、木瓜蛋白酶，胃蛋白酶，（Fab）2；3、酪氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，280；4、别构效应；5、①抑制血小板凝集②改变cGMP水平，参与神经递质信号转导③激活DNA修复酶④高浓度时促进前列腺素的合成⑤引起细胞衰老和死亡；6、α螺旋结构；7、脂肪酸链的不饱和度；8、受体；9、三磷酸肌醇/IP3；10、锌指，亮氨酸拉链，α-螺旋-转角-α-螺旋；11、锌指，修饰，剪切，添加CCA尾，编辑；12、mRNA，rRNA；13、磷酸二酯酶，N-糖苷酶；14、3；15、核糖体结合位点，起始密码子，终止密码子；16、丙酮羧化，ATP，磷酸烯醇丙酮酸羧化，GTP；17、烟酰胺核苷酸，黄素腺嘌呤二核苷酸，辅酶A
四、问答题
1、Prusiner的主要贡献是研究疯牛病的过程，发现了某些蛋白质的立体结构可受到一些非核酸因素的影响而发生改变。同时这些立体结构的改变进一步引起其它相同蛋白质立体结构的改变，整个过程犹如病原体的“感染”。立体结构改变的蛋白质可以导致不容型的聚集物的形成，最终发生病变。有这些结果产生了两个方面概念的改变，一是某些疾病的感染可以不需要核酸，二是相同一级结构的蛋白质可以呈现不同的立体结构，即蛋白质的高级结构除了一级结构外，还受其他因素的影响。
2、真核生物的RNA聚合酶，按照对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类：RNA聚合酶Ⅰ基本不受α-鹅膏蕈碱的抑制，在大于10-3M/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶Ⅱ对α-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-8M/L一下就会被抑制。RNA聚合酶Ⅲ对α-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅱ之间，在10-5M/L到10-4M/L才会有抑制现象。
RNA聚合酶Ⅰ存在与核仁中，其功能是合成5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA。
RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中，其功能是合成mRNA、snRNA。
RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中，其功能是合成tRNA和5SrRNA及转录Alu序列。
相关内容：原核生物的DNA聚合酶及功能，真核生物的DNA聚合酶及功能，转录调控，复制的调控。
3、（1）根据以下原理：①初始转录物的5’端为三磷酸基（ppp-），3’端为核苷；②RNase T1的专一性是切割RNA鸟苷3’磷酸酯键（-Cp↓）；③RNase A的专一性是切割RNA嘧啶核苷3’磷酸酯键（-Cp↓+ -Up↓），故起始转录物是pppUpUpApGpCpApU
（2）根据毗邻分析原理：a-32p-NTP中的a-32p可掺入到该核苷5’邻位核苷的3’位。因此，转录时加入a-32p-GTP，产物经修饰后用RNase T2酶解得到I32p，表明是序列中的A32-pG→I32pG;同样转录时加入a-32p-UTP，产物经修饰后RNase T2酶解得到m1I32p，表明是序列中的A32pU→m1I32pU，所以初始转录物经修饰得到的序列是：pppUpUpIpGpCpm1I32pU。（3）略。
4、乙酰辅酶A是活化了的乙酸基团（CH3CO-=乙酰基）与辅酶A的半胱氨酸残基的SH-基团相连。这其实是硫酯。它是脂肪酸的beta-氧化及糖酵解后产生的丙酮酸氧化脱羧的产物。在三羧酸循环的第一步，乙酰基转移到草酰乙酸中，生成柠檬酸。循环也叫柠檬酸循环。乙酰辅酶A是人体内重要的化学物质。首先，丙酮酸氧化脱羧，脂酸的beta-氧化的产物。同时，它是脂酸合成、胆固醇合成、酮体生成的碳来源。三大营养物质的彻底氧化殊途同归，都会生成乙酰辅酶A以进入三羧酸循环，即通过三羧酸循环将糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢彼此沟通，有机联系在一起。

中科院1999生化与分子

一、是非题：20题，共20分。答“是”写“+”，答案“非”写“一”，写在题后的（ ）中。
1、单克隆和多克隆抗体的差别在于制备方式的不同。
2、气体分子，如NO，是可以作为信号分子在生物体内行使功能的。
3、二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构。
4、所有信号肽的位置均在新生肽的N端。
5、对于可逆性抑制剂的抑制作用，抑制50%时的抑制剂浓度等于其抑制解离常数Ki。
6、在酶的催化反应中，HIS残基的咪唑基既可以起碱催化作用，也可以起酸催化作用。
7、蛋白激酶对蛋白质磷酸化的部位除了Ser、Thr、和Tyr外，还有His、Cys、Asp等。
8、维生素B1的化学名称为硫胺素，它的磷酸酯为脱羧辅酶。
9、线粒体内膜与外膜的结构完全不同，它们是完全分开互不接触的两种膜。
10、细胞色素氧化酶与细胞色素b-c1复合物的三维空间结构已得到阐明。
11、氧化磷酸化也是可逆的。
12、嗜盐菌视紫红蛋白与视网膜视紫红蛋白不同，前者经光照后导致跨膜质子梯度，后者经光照后导致跨膜钠离子流动。
13、端粒酶（telomerase）是一种反转录酶。
14、转录不需要引物，而反转录必须有引物。
15、DNA复制时，前导链合成方向是5’→3’，后随链则是3’→5’生成。
16、人基因组的碱基对数目为2.9×109，是自然界最大的。
17、细胞器DNA的复制并不限于S期，可在细胞周期的各期中进行。
18、基因转录的终止信号应位于被转录的序列以外的下游区。
19、真核生物细胞核内不均一RNA(hnRNA)分子量虽然不均一，但其半衰期长，比胞质成熟mRNA更为稳定。
20、DNA复制是在起始阶段进行控制的，一旦复制开始，它即进行下去，直到整个复制子完成复制。
二、选择题：25题，每题一分，共25分。
1、生长调节素（omtomedin）是  
A．胰岛素  B．生长激素  C．胰岛素样生长激素Ⅰ和Ⅱ  D．表皮生长因子
2、生物体内氨的转运主要通过  
A．尿素循环  B．谷氨酰胺  C．尿酸
3、识别信号肽的是一种信号识别颗粒，它是    
A．糖蛋白  B．信号肽  C．脂蛋白  D．核蛋白
4、微管蛋白的异二聚体上的结合位点是 
A．GTP  B．ATP  C．cAMP  D．ADP 
5、基因剔除（knock out）的方法主要是用来阐述 
A．基因的结构        B．基因的调控        C．基因的表达        D．基因的功能
6、胰凝乳蛋白酶的活性中心中构成一个电荷中继网的三个氨基酸残基是
A．His，Arg，Glu  B．Ser，Lys，Asp  C．Ser，His，Asp  D．Ser，Arg，Glu
7、MWC模型和KNF模型的一个区别是
A．MWC模型可以解释正协同性，而KNF模型不能 
B．MWC模型可以解释负协同性，而KNF模型不能
C．MWC模型不能解释正协同性，而KNF模型能    
D．MWC模型不能解释负协同性，而KNF能
8、琥珀酸脱氢酶所需要的辅酶（基）是    
A．CoA    B．FAD    C．NAD+    D．NADP+
9、对于一个遵守米氏方程的酶，当活性达到最大反应速度的99%时，底物浓度是其Km值的倍数为
A．10    B．100    C．90   D．99 
10、一个酶有多种底物，判断其底物专一性强弱应依据参数  
A．Kcat      B．Km      C．Kcat/Km
11、NO的生成主要来自 
A．组氨酸  B．赖氨酸  C．精氨酸  D．谷氨酸胺
12、哺乳动物细胞质膜的标志酶是  
A．钠钾ATP酶  B．细胞色素氧化酶  C．H+-ATP  D．谷氨酸胺
13、辅酶Q是一种化合物，它含  
A．硫胺素  B．异咯嗪结构  C．异戊二烯单位的醌类  D．铁、硫
14、典型哺乳动物细胞内外的Na+，K+离子浓度
A．细胞内Na+，K+均比细胞外高           B．细胞内Na+，K+均比细胞外低
C．细胞内K+比细胞外高，Na+比细胞外低    D．细胞内Na+比细胞外高，K+比细胞外低
15、当线粒体呼吸处于状态4时，内膜两侧的pH差可以达到
A．0.1PH单位     B．1PH单位     C．1.5PH单位     D．>2PH单位
16、端粒酶（telomerase）是一种蛋白质-RNA复合物，其中RNA起
A．催化作用  B．延伸作用  C．引物作用  D．模板左右
17、新生多肽链的信号肽与下列哪种物质识别，从而引导肽链进入内质网
A．核糖体  B．核糖体亚基  C．信号肽酶  D．信号肽识别颗粒（SRP）
18、真核生物mRNA帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接，其方式是
A．2’-5’         B．3’-5’            C．3’-3’           D．5’-5’
19、与核酸中嘌呤环和嘧啶环上的原子来源都有关的氨基酸是
A．丙氨酸  B．天冬氨酸  C．亮氨酸  D．甲硫氨酸 
20、大肠杆菌mRNA上起始密码子上有的SD序列可与某种RNA的3’端配对，然后启动多肽链生成，这种RNA是            
A．tRNA         B．SnRNA          C．16srRNA           D．23srRNA 
21、染色质DNA的碱基可被甲基化，DNA甲基化的作用是
A．关闭某些基因                                        B．活化某些基因 
C．可关闭某些基因，同时可以活化另一些基因              D．与基因表达的调节无关
22、遍在蛋白（ubiquitin）广泛分布于各类细胞，它与蛋白质结合后，造成
A．蛋白质更加稳定 B．蛋白质有效转运  C．蛋白质迅速降解 D．蛋白质固定在细胞膜上
23、DNA损伤的光修复作用是一种高度专一的修复方式，它只作用于紫外线引起的
A．嘧啶二聚体             B．嘌呤二聚体                  C．嘧啶-嘌呤二聚体
24、λ噬菌体侵入寄主细胞后，决定它进入裂解循环的基因产物是   
A．N    B．Q    C．Cro   D．CI
25、环状的线粒体DNA进行复制的方法采用      
A．多起点双向   B．滚环  C．D-环  D．单起点双向
三、填空题；12题，共25分，一空一分。
1、糖蛋白中糖苷链主要有两类，即_______和_______。
2、氨基酸氨基中的一个H原子可以被烃基取代，称为烃基化反应，反应生成_______或简称_______，此反应可被用来鉴定多肽或蛋白质的_______末端氨基酸。
3、酶与配基结合实验的Scatchard作图表现为一种罩形曲线，表明酶与配基结合具有_______。
4、TPCK是通过对_______残基的烷化而专一的对_______酶进行亲和标记。
5、维生素D原和胆固醇的化学结构中都具有_______的结构。
6、磷酸化酶激酶是一种依赖_______的蛋白激酶。
7、线粒体氧化磷酸化呼吸控制的定量表达是_______。
8、与G蛋白偶联的质膜受体均有_______的结构。
9、线粒体内膜胞浆侧的膜电位比基质侧_______。
10、在反密码子与密码子的相互作用中，反密码子IGA可是别的密码子有_______、_______、_______。