（4）研制和生产生物活性物质。
                将在医学领域中有价值的生物活性蛋白基因导入家畜或家禽的受精卵，再发育成的转基因动物体液或血液、乳、尿、腹水中收获基因产物，便可获得大量有价值的生物活性蛋白。
2、细胞外基质的生物学作用并简述其在细胞生物学中的应用
答：生物学作用：①细胞外基质将细胞黏在一起构成组织；②提供一个细胞外网架，在组织中或组织间起支持作用；③细胞外基质三维结构及成分的变化往往改变了细胞微环境，从而对细胞形态、生长、分裂、分化和凋亡起重要的调控作用。
①    细胞外基质的结构作用    细胞外基质大分子以高度有序的形式组装成具有组织特异性的网络结构。以胶原为骨架选择性的与非胶原糖蛋白、蛋白聚糖及弹性蛋白结合成三维精细结构。赋予组织以韧性、弹性、保水性及对机械力的缓冲性，并为细胞提供生存及活动的微环境。
②    影响细胞的存活与死亡   如上皮细胞及内皮细胞粘附于细胞外基质的天然成分上可以存活，若脱离细胞外基质则发生凋亡。不同细胞可能依赖于不同的整合素介导的粘附而存活。
③    决定细胞的形状    同一种细胞在不同的基质上可表现出完全不同的形状。几乎所有组织细胞均可在一定的基质上粘着、铺展，呈现一定的形状。
④    控制细胞的增殖    细胞的形状影响细胞的增殖。大多数正常真核细胞在球形状态下不能增殖。体外培养的细胞只有在一定基质上粘附并铺展才能进行增殖。试验证明，细胞粘着于适当的基质上才进行蛋白质及RNA的合成；在铺展状态下才进行DNA的复制。
⑤    控制细胞的分化   细胞外基质在胚胎发育、器官形成、组织与细胞分化上发挥重要的调控作用。细胞外基质成分与细胞表面受体结合，可启动细胞内信号传递的某些连锁反应而最终影响基因的表达，控制细胞的表型。
⑥    参与细胞的迁移   细胞迁移在胚胎发育、形态发生及成体中组织再生与创伤修复时十分活跃。细胞外基质可以控制细胞迁移的方向与速度，并为细胞迁移提供“脚手架”。
⑦    促进创伤的修复   软组织损伤时，血浆纤粘连蛋白与纤维蛋白共同构成血凝块中的纤维，成为组织修复的初始基质。纤粘连蛋白可吸引成纤维细胞、平滑肌细胞及内皮细胞到创伤部位修补损伤组织，然后纤维化，形成瘢痕组织；细胞外基质成分还可刺激上皮细胞向血块迁移而闭合创面。
3、简述流式细胞仪的细胞分选原理并举例说明其在细胞生物学中的应用
答：分选原理：　将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度，这样，鞘液就能够包绕着样品高速流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过检测区域。
流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测，这种信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的接受方向与激光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号。
这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，经光电倍增管接收后可转换为电信号，再通过模/数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理，将分析结果显示在计算机屏幕上。
细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。
应用：
（1）细胞周期和动力学分析   细胞周期分为G1、S、G2和M期。用荧光染料PI对细胞的DNA染色，用FCM分析细胞中DNA含量，与DNA结合的荧光染料越多，荧光强度越强。由于细胞DNA在各期中不同，可确定G1/G0、S 及G2/M期各期的百分比。
（2）测定细胞周期蛋白、癌基因及抗癌基因蛋白   用FCM可测定cyclinA 、B、E及D等，分析其表达与肿瘤细胞周期的关系。 增殖细胞核抗原（PCNA）是一种稳定的细胞周期相关性核蛋白，在G1期早期和S期早期之间，PCNA水平升高2~3倍，在整个G2期保持低值。Ki-67核抗原可在细胞周期全过程中可见，而静止期G0细胞无表达。用FCM可测定PCNA及Ki-67核抗原。
（3）细胞凋亡研究上的应用   
常用方法有：①碘化丙啶(PI)染色法。由于凋亡细胞DNA被降解，导致对DNA染料着色能力下降，用PI荧光染料对DNA降解进行测定，分析细胞周期的改变，观察是否有亚二倍体细胞出现。②连接素Ⅴ（Annexin V）/PI双染色法：早期凋亡细胞因细胞膜的磷脂对称性改变而使磷脂丝氨酸暴露于细胞膜外，而Annexin V对PS有极强的亲和性，PI对凋亡早期细胞膜完整的细胞拒染，而凋亡晚期的继发坏死细胞可同时被AnnexinⅤ与PI标记，正常活细胞均不被二者染色。因此利用流式细胞仪可作双参数测定，定量分析正常活细胞、坏死细胞和凋亡细胞数。
（4）有利于肿瘤的早期诊断和鉴别诊断　良性肿瘤或良性增生时不会出现非整倍体细胞（DI＞１），而恶性肿瘤则伴有相当数量的非整倍体出现，相当部分癌前病变也有非整倍体的出现。所以非整倍体细胞是判断肿瘤恶变的一个重要标志。
（5）有利于判断肿瘤的预后　有学者研究发现恶性肿瘤组织学分级越高，出现非整倍体或异倍体的比例越大，更容易出现转移，预后也越差。
（6）细胞内pH及Ca2+测定   用Ca2+特异的Fluo-3染料标记细胞，可用FCM测定Ca2+变化。用SNARF-1标记细胞，用FCM可测定细胞内pH。
（7）多药耐药性检测    多药耐药基因的产物为p-糖蛋白，也称p-170。P-170在部分正常细胞上表达外，在许多肿瘤细胞中高表达。用抗p-170抗体标记肿瘤细胞，用流式细胞术可直接测定p-170表达。
（8） FCM还可用于细胞核型分析、精子和精细胞的分析及测量细胞突变。
4、举例说明‘原癌基因’或‘抑癌基因’在细胞增殖和细胞凋亡中的作用
答：原癌基因（proto-oncogene）,是控制细胞生长和分裂的正常基因的一种突变形式，能引起正常细胞癌变。癌基因最早发现与诱发肿瘤的劳氏肉瘤病毒，它携带Src基因，该基因对细胞繁殖不是必要的，但当病毒感染鸡体后可引起细胞癌变。
    癌基因编码的蛋白主要包括生长因子（sis,血小板生长因子）、生长因子受体（frm,CSF-1受体；erbB，上皮生长因子受体）、信号转导通路中的分子（Src，酪氨酸蛋白激酶；mos，丝氨酸蛋白激酶；Ras，GTP结合蛋白）、基因转录调节因子（fos，转录因子API；myc,转录调节蛋白）和细胞周期调控蛋白（Rb，p53，肿瘤抑制因子）等。细胞信号转导是细胞增殖与分化过程的基本调节方式，而信号转导通路中蛋白因子的突变是细胞癌变的主要基因。如人类各种癌症中约30%癌症是信号转导通路中的ras基因（编码GTP结合蛋白）突变引起的。还有编码酪氨酸蛋白激酶的Src，编码丝氨酸蛋白激酶的mos基因，编癌基因产物常常是正常细胞不表达、或表达量很少、或表达产物活性不能调控的一类蛋白。
    抑癌基因（tumor suppressor gene）:是正常细胞增殖过程中的负调控因子，它编码的蛋白往往在细胞周期的检验点上起阻止周期进程的作用。如果抑癌基因突变，丧失其细胞增殖的负调控作用，将导致细胞周期失控而过度增殖。如视网膜母细胞瘤中的Rb基因、p53基因，这两种基因编码的蛋白都是细胞周期调控蛋白，属于肿瘤抑制因子，这些基因突变失活会导致肿瘤发生。
    通过细胞增殖相关基因和抑制细胞增殖相关基因的协同作用，共同调控细胞的正常增殖过程。如果这两类基因发生突变，破坏了正常细胞增殖的调控机制，细胞转变为能无限增殖的肿瘤细胞。

动物所细胞生物学2008
问答题
1减数分裂和有丝分裂的区别
答：1 减数分裂过程中细胞连续分裂两次，而有丝分裂过程中细胞只分裂一次； 　
2．减数分裂的结果是染色体数目减半，而有丝分裂的结果是染色体数目不变； 　
3．减数分裂后，一个细胞变为四个含有不同遗传物质组合的子细胞（考虑四分体中非姐妹染色单体片段交换）或者两两相同的子细胞（不考虑单体片段交换）。而有丝分裂后，一个细胞只形成两个遗传物质相同的子细胞； 　
4．减数分裂过程中有同源染色体配对和同源非姐妹染色单体间的局部交换，而有丝分裂没有。　　
5．减数分裂发生部位为精巢卵巢（高等雄性动物则发生在睾丸，高等植物发生在花药和胚珠中），有丝分裂发生部位为体细胞（当原始生殖细胞即性原细胞发生增殖时属于有丝分裂）。 　　
6初级卵母细胞分裂时细胞质不均匀分裂，且有第二极体产生，第二极体会逐渐消失，而有丝分裂不会产生这种现象。
2细胞坏死和调亡的区别
答：细胞凋亡是一种主动的基因决定的细胞自我破坏的过程，而坏死是极端的物理、化学因素或严重的病理性刺激引起的细胞损伤和死亡。
二者区别：细胞凋亡过程中，细胞膜反折，包裹断裂的染色质片段或细胞器，然后逐渐分离，形成众多的凋亡小体，凋亡小体被邻近的细胞吞噬，整个过程中，细胞膜的整合性保持良好，死亡细胞的内容物不会逸散到胞外环境中去，因而不引发炎症反应。
    细胞坏死时，细胞膜发生渗漏，细胞内容物包括膨大和破碎的细胞器及染色质片段，释放到细胞外，导致炎症反应。
3主动运输和被动运输的区别
答：①运输方向不同：主动运输逆浓度梯度或电化学梯度，被动运输：顺浓度梯度或电化学梯度；
②是否需要载体的参与：主动运输需要载体参与，被动运输方式中，简单扩散不需要载体参与，而协助扩散需要载体的参与；
③是否需要细胞直接提供能量：主动运输需要消耗能量，而被动运输不需要消耗能量；
④被动运输是减少细胞与周围环境的差别,而主动运输则是努力创造差别,维持生命的活力。
4.基因功能的研究办法，简述3类及原理
答：① 微阵列分析（microarray），是一项可用于大规模快速检测基因差异表达、基因组表达、DNA序列多态性、致病基因或疾病相关基因，研究基因功能的技术。它包括cDNA微阵列（cDNA microarray）和DNA芯片。
原理：将成千上万条DNA片段（cDNA、表达序列标签expressed sequence tag, EST、或特异的寡核苷酸片段）按横行纵列方式有序点样在固相支持物上。固相支持物为硝基纤维膜或尼龙膜时称为微阵列。固相支持物改为指甲盖大小的玻片或硅片时所形成的微阵列称为DNA芯片。
     先用来自不同生理状态和发育阶段的mRNA作为模板，以放射性同位素或荧光标记的dNTP为底物反转录合成cDNA。再用所得cDNA与微阵列或DNA芯片进行杂交，然后通过计算机对结果进行判读和处理，这样就可知芯片中哪些基因在细胞里表达，哪些基因不表达；也可检测哪些基因表达水平高，哪些表达水平低。
② 基因转导技术：将目的基因转入某一细胞中，然后观察该细胞生物学行为的变化，从而了解该基因的功能。这是目前应用最多、技术最成熟的研究基因功能的方法之一，但基因表达受转导效率和是否持续稳定表达的影响。主要方法有物理、化学和生物的方法。
物理方法：1）DNA直接注射法：是目的基因导入的最简单方法，但注入量有限，能接触到的细胞有限，故获得的细胞转化率很低，多通过肿瘤局部多点注射给药。
2）颗粒轰击技术：将目的基因包被金属后，利用高压发射装置，加速包裹目的基因的金属颗粒进入细胞，从而提高肿瘤细胞的转化率。
化学方法：1）脂质体载体：具有安全、简单、低毒、无免疫原性等优点，适用于注射方法进行器官靶向性转移并有一定的转移效率。是除病毒载体转移方法外另一种有价值的体内基因转移方法。
          2）受体介导法：利用肝细胞上富含转移因子和糖蛋白受体的特定，人工合成多聚阳离子氨基酸，进而连接转移因子（或糖蛋白）和目的基因构成复合物，通过与肝细胞表面的受体结合实现目的基因的转移。
优点：靶向性好，但受体介导的内吞小泡会被转运到溶酶体，易被溶酶体降解而造成目的基因表达时间短暂，表达效率低下。利用腺病毒与内吞小泡相融合而将其破坏释放出外源DNA，可提供转化效率。
生物学方法（主要通过构建病毒载体来完成）
病毒表达载体：以病毒为载体介导的基因转移技术，因其转染效率高、目的基因可稳定表达等优势被广泛应用。
1）    逆转录病毒（retrovirus, Rv）：构建简单，装载外源基因容量最大达8kb，整合入宿主细胞基因组而无病毒蛋白表达。但仅能感染分裂期细胞，体外制备滴度较低，且其随机整合有因其“插入性突变”的可能。
2）    腺病毒（adenovirus, Adv）：装载外源基因容量最大达35kb，不整合入宿主细胞基因组因而避免插入突变的危险，能感染分裂细胞和非分裂细胞，但易引起宿主免疫反应而使转染效率下降。
③反义技术：根据碱基互补原理，利用人工或生物合成的特异互补的DNA或RNA片段（或其修饰产物）来抑制或封闭目的基因的表达。包括反义寡核苷酸技术（Antisense oligonuclerotides, ASON）、反义RNA技术和合酶（ribozyme）技术。
反义寡核苷酸技术：反义核苷酸是一类经人工合成或构建的反义表达载体表达的寡核苷酸片段，长度多为15-30 np，通过碱基互补原理，干扰基因的解旋、复制、转录、mRNA的剪接加工乃至输出和翻译等各个环节，从而调节细胞的生长、分化等。根据结合部位不同分为反义DNA（asDNA）、反义RNA（asRNA）、自催化性核酶（ribozyme）。
反义RNA技术：利用基因重组技术构建人工表达载体，使其离体或体内表达反义RNA，反义RNA能与靶mRNA形成较稳定的二聚体，从而抑制靶基因的表达。其作用机理可能在DNA复制、转录及翻译多水平上抑制靶基因的表达。
核酶技术（ribozyme）：是一类具催化活性的特殊RNA分子，通过碱基配对原则特异性灭活靶RNA分子。可裂解与其互补的mRNA及在DNA内插入DNA片段构成三链结构，单个核酶分子可以结合多个mRNA分子并使之在特定部位断裂，而其本身具有较稳定的空间结构，不易受RNase攻击，因而催化效率比反义RNA高。常见的核酶有锤头状、发夹状和斧头状，应用最多的是锤头状核酶。
反义技术的两种技术路线：
1）    将表达与体内基因或mRNA互补序列的基因转入体内，是细胞表达与目标基因互补的mRNA失活，从而阻断目标基因的表达。
2）    体外合成mRNA互补的核苷酸类似物，通过静脉注射等途径进入细胞，特异性的与目标mRNA作用。
④基因敲除和敲入
基因敲除（gene knockout）：又称基因打靶，是同源重组技术的形象说法。通过一定途径使特定的基因失活或缺失的技术。指用外源DNA与受体细胞基因组中顺序相同或非常相近的基因发生同源重组，整合到受体细胞基因组中并得到表达的一种外源DNA导入技术。
优点：整合位点确定、精确，转移基因频率较高，既可以用正常基因敲除突变的基因，以进行形状的改良和遗传病的治疗；又可用突变的基因敲除正常的基因，以研究此基因在发育和调控反面的作用。
目前利用基因敲除得到转基因动物的程序：
1）    克隆基因组中某一基因的全部或部分DNA序列，用插入、删除、置换、修饰等手段重建DNA序列，使之成为靶载体；
2）    将靶载体导入小鼠的胚胎干细胞中，使外源DNA与胚胎干细胞基因组相应部分发生同源重组，将靶载体的DNA序列整合到内源基因组中；
3）    将胚胎干细胞受体细胞注入小鼠的囊胚，将这些囊胚导入贾芸母鼠子宫中，产生的雄性嵌合鼠子代与正常的雌鼠交配即可获得生殖系统携带该基因的纯合鼠，进而分析被剔除基因的功能。
基因敲入：通过基因打靶用一种基因替换另一种基因以确定它们是否具有相同功能。
          是一个类似于普通基因敲除发的一步同源重组过程，不同在于设计打靶载体时需要将靶基因第一个外显子的N-端序列缺失，并将新的替换基因置于靶基因的调控序列之下，使其能精确地按照靶基因的调控模式表达。此方法不仅能用一种基因置换另一种基因，且可以系统地改变基因的结构，分析其担保产物各功能区的作用。
5.真核与原核细胞的启动子的结构和功能及翻译起始的差别与一同点试验设计假设某一基因对某一生物功能有作用，设计试验方法，技术路线，分组，检测参数，可能的结论来验证

 2000年中科院动物所细胞生物学考博试题
一、 名词解释（每词3分，共30分）
 1． 着丝粒:是真核生物细胞进行有丝分裂和减数分裂时染色体分离的一种装置。
 2． 微管
3． 溶酶体
4． 核孔复合体
5． 细胞周期蛋白：cyclin，在真核细胞周期中浓度周期性、有规律升高和降低的一类蛋白质家族。是细胞周期调节分子，这类蛋白质通过活化周期蛋白依赖激酶调节细胞周期各时相的转换与进行。
6. 核骨架：核基质（nuclear matrix ）或称核骨架（nucleoskeleton）为真核细胞核内的网络结构，是指除核被膜、染色质、核纤层及核仁以外的核内网架体系。主要组分有三类：①非组蛋白性纤维蛋白 ②少量RNA和DNA ③少量磷脂（1.6%）和糖类（0.9%）。功能：1．为DNA的复制提供支架，DNA是以复制环的形式锚定在核骨架上的，核骨架上有DNA复制所需要的酶，如：DNA聚合酶α、DNA引物酶、DNA拓扑异构酶II等。DNA的自主复制序列（ARS）也是结合在核骨架上。2．是基因转录加工的场所，RNA的转录同样需要DNA锚定在核骨架上才能进行，核骨架上有RNA聚合酶的结合位点，使之固定于核骨架上，RNA的合成是在核骨架上进行的。新合成的RNA也结合在核骨架上，并在这里进行加工和修饰。3．与染色体构建有关，现在一般认为核骨架与染色体骨架为同一类物质，30nm的染色质纤维就是结合在核骨架上，形成放射环状的结构，在分裂期进一步包装成光学显微镜下可见的染色体　
 7. 核糖体 ：ribosome，细胞器的一种，为椭球形的粒状小体，是一种核糖核蛋白颗粒(ribonucleoprotein particle)，主要由RNA和蛋白质构成，其功能：按照mRNA的指令将氨基酸合成蛋白质多肽链，是细胞内蛋白质合成的分子机器。由大小亚基组成。
8. 细胞程序性死亡：programmed cell death， 
9. 主动运输 ：
10. 静息电位 ：（Resting Potential，RP）是指细胞未受刺激时，存在于细胞膜内外两侧的外正内负的电位差。它是一切生物电产生和变化的基础。
二．    试述核小体的结构，核小体与 DNA复制、转录的关系。（20分）
答：核小体是染色体的基本结构单位，由DNA和组蛋白(histone)构成，是染色质（染色体）的基本结构单位。由4种组蛋白H2A、H2B、H3和H4， 每一种组蛋白各二个分子，形成一个组蛋白八聚体，约200 bp的DNA分子盘绕在组蛋白八聚体构成的核心结构外面，形成了一个核小体。
    每个核小体单位包括约200 bp的NDA和一个组蛋白八聚体，及一分子组蛋白H1。组蛋白八聚体构成核小体的盘状核心结构，由4个二聚体组成，包括2个H2A•H2B和2个H3•H4。2个H3•H4形成四聚体位于核心颗粒中央，2个H2A•H2B二聚体分别位于四聚体两侧。每个二聚体通过离子键和氢键结合约30 bp DNA。146 bp DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈。组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20 bp DNA，锁住核小体DNA的进出端，稳定核小体。两个相邻核小体间以连接DNA相连。
NDA以绊环形式锚定在核基质纤维上，绊环由核小体组成，呈线性排列，可以转录。DNA复制的位置在核基质上，DNA绊环固着在核基质上，新合成的DNA先结合在核基质上，然后逐步转移。一个绊环可能有几个复制起始点，只有起始点结合到核基质时，DNA合成才能开始。DNA绊环通过特定的核苷酸序列（被称为MAR序列，matrix-attached region），该序列富含AT，它通过与核基质相互作用，调节基因的复制与转录等。DNA绊环与DNA复制有关的酶和因子锚定在核基质上形成DNA复制体（replisome）进行DNA复制和合成。dNTP的合成和DNA新生链的合成都在复制体中完成。从链的起始到链的终止，整个过程都在核基质上进行，核基质可能是DNA复制的空间支架。
真核细胞转录过程可能分两步：一局部染色质解凝集成疏松态，从而允许特定的基因转录因子与DNA调节序列接触；二基因转录因子与DNA顺式元件结合组装，调节基因转录。但转录因子如何作用于包装在核小体上的DNA调节序列，是否需要核小体解开？目前有两种假说模型。
一种假说认为RNA聚合酶能通过核小体进行转录，不需要核小体移位，被包装进入核小体的DNA调节序列仍能被转录因子识别和结合，但需要阻抑启动子作用的组蛋白如 H2A-H2B 二聚体的移位。一旦转录开始后，RNA聚合酶Ⅱ能通过核小体或使部分核小体去组装进行转录。但与该模型矛盾的是一般认为在启动子TATA box 上的通用转录因子是不能在已包装的核小体的启动子上起作用的。
  因此提出另一种假说和模型。这种假说认为转录起始过程中需要核小体移位，即当活化蛋白（活化基因转录的转录因子）与DNA调节序列结合后，影响了核小体从启动子上移位，或去组装暴露出启动子从而允许通用转录因子与启动子结合起始复合物的组装。
三．    扼要阐述细胞通讯中信息跨膜传递的方式与机制。（20分）
答：通过细胞内受体介导的信号传递：
亲脂性信号分子（甾类激素、甲状腺素），分子小，疏水性强，可通过简单扩散跨过细胞膜进入细胞，与细胞质或细胞核中受体结合形，形成激素—受体复合物。细胞内受体本质是激素激活的基因调控蛋白。在细胞内，受体与抑制性蛋白结合形成复合物，处于非活化状态。配体与受体结合，导致抑制性蛋白从复合物上解离下来，受体暴露其DNA结合位点而被激活。形成的成激素—受体复合物再转至核内，调节基因表达。
通过细胞表面受体介导的信号跨膜传递：
亲水性信号分子（神经递质、生长因子、局部化学递质和大多数激素），一般不能直接穿过靶细胞质膜，只能通过与靶细胞表面受体结合，再经信号转导，在细胞内产生第二信使或激活蛋白激酶或蛋白磷酸酶的活性，引起细胞应答。
根据信号转导机制和受体蛋白类型不同，细胞表面受体分3大家族：
（1）    离子通道偶联的受体   是由多亚基组成的受体—离子通道复合体，本身既有信号结合位点，又是离子通道，其跨膜信号转导无需中间步骤。主要存在于神经细胞或其他可兴奋细胞间，神经与受体结合，改变了通道蛋白的构象，导致离子通道的开启或关闭，改变质膜的离子通透性，在瞬间将胞外化学信号转换为电信号，继而改变突触后细胞的兴奋性。
（2）    G蛋白偶联的受体    配体—受体复合物通过G蛋白偶联，与靶蛋白发生作用。由G蛋白偶联受体介导的信号通路主要包括：cAMP信号通路和磷脂酰肌醇信号通路。
cAMP信号通路：胞外信号与细胞表面G蛋白偶联受体结合，激活质膜上的腺苷酸环化酶，腺苷酸环化酶使细胞中cAMP急剧增加（cAMP水平可被磷酸二酯酶降解）。cAMP与cAMP依赖的蛋白激酶A的调节亚基结合，改变调节亚基构象，使蛋白激酶A活化，释放的催化亚基使细胞中某些蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化，激活靶酶，开启基因表达。
磷脂酰肌醇信号通路：胞外信号分子与细胞表面G蛋白偶联受体结合，激活质膜上的磷脂酶C（PLC），使质膜上4,5-二磷酸脂酰肌醇（PIP2）水解成1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）和二酰基甘油（DG），使胞外信号转换为胞内信号。IP3动员细胞内源钙到细胞溶质，使胞内Ca2+浓度升高；DG激活蛋白激酶C（PKC），活化的PKC进一步使底物磷酸化，并可活化Na+/H+交换引起细胞内pH升高。