6、简述原核生物DNA的复制特点。
答：①真核生物的染色体上可以有多处复制起点
②真核生物的染色体在全部完成复制之前，各个起始点上DNA的复制不能再开始
③在真核生物细胞中，DNA的复制只是细胞周期的一部分，它只在S期进行
④真核生物的复制子相对较小，其长度40~100kb
7、细胞通过哪几种修复系统对DNA损伤进行修复？
答：错配修复、切除修复、重组修复、DNA直接修复、SOS系统
8、什么是转座子？可分为哪些种类？
答：转座子是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。分为两大类：插入序列和复合型转座子
9、什么是编码连？什么是模板链？
答：（1）与mRNA序列相同的那条DNA链称为编码链或称有意义链
（2）把另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA合成的DNA链称为模板链或称反义链
10、大肠杆菌的RNA聚合酶有哪些组成成分？各个亚基的作用如何？
答：（1）大肠杆菌RNA聚合酶由2个α亚基、一个β亚基、一个β’亚基和一个ω亚基组成，称为核心酶。加上一个σ亚基后则成为聚合酶全酶（holoenzyme），相对分子质量为4.65×105。
（2）研究发现，由β和β’亚基组成了聚合酶的催化中心，它们在序列上与真核生物RNA聚合酶的两个大亚基有同源性。β亚基能与模板DNA、新生RNA链及核苷酸底物相结合。
σ因子可以极大地提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列的亲和力，加入σ因子以后，RNA聚合酶全酶识别启动子序列的特异性总共提高了107倍。σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始，转录的起始从化学过程来看是单个核苷酸与开链启动子-酶复合物相结合构成新生RNA的5’端，再以磷酸二酯键的形式与第二个核苷酸相结合，起始的终止反映在σ因子的释放。过去认为二核苷酸的形成就是转录起始的终止，实际上，只有当新生RNA链达到6-9个核苷酸时才能形成稳定的酶-DNA-RNA三元复合物，才释放σ因子，转录进入延伸期。
11、简述seta因子的作用？
答；σ因子可以极大地提高RNA聚合酶对启动子区DNA序列的亲和力，加入σ因子以后，RNA聚合酶全酶识别启动子序列的特异性总共提高了107倍。σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始，转录的起始从化学过程来看是单个核苷酸与开链启动子-酶复合物相结合构成新生RNA的5’端，再以磷酸二酯键的形式与第二个核苷酸相结合，起始的终止反映在σ因子的释放。过去认为二核苷酸的形成就是转录起始的终止，实际上，只有当新生RNA链达到6-9个核苷酸时才能形成稳定的酶-DNA-RNA三元复合物，才释放σ因子，转录进入延伸期。
12、什么是pribnow box ？他的作用是什么？
答：在启动子区内有一个由5个核苷酸组成的共同序列，是RNA聚合酶的紧密结合点，现在称为Pribnow区(Pribnow box)，这个区的中央大约位于起点上游10bp处，所以又称为-10区。
绝大部分启动子都存在位于-10bp处的TATA区和-35bp处的TTGACA区。这两段共同序列是RNA聚合酶与启动子的结合位点，能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力。Pribnow区（Pribnow box）这个区的中央大约位于起点上游10bp处，所以又称为–10区。TTGACA。这个区的中央大约位于起点上游35bp处，所以又称为–35区。–10位的TATA区和–35位的TTGACA区是RNA聚合酶与启动子的结合位点，能与σ因子相互识别而具有很高的亲和力。
13、简述原核生物和真核生物 mRNA 的区别。
答：1，原核生物 mRNA 常以多顺反子的形式存在。真核生物 mRNA 一般以单顺反子的形式存在；2，原核生物 mRNA 的转录与翻译一般是偶联的，真核生物转录的 mRNA 前体则需经转录后加工，加工为成熟的 mRNA 与蛋白质结合生成 信息体后才开始工作；3，原核生物 mRNA 半寿期很短，一般为几分钟 ，最长只有数小时。真核生物 mRNA 的半寿期 较长， 如胚胎中的 mRNA 可达数日；4，原核与真核生物 mRNA 的结构特点也不同，原核生物的 mRNA 的 5’端无帽 子结构，3’端没有或只有较短的 poly A 结构。
14、大肠杆菌的终止子有哪两大类？请分别介绍一下它们的结构特点。
 答：大肠杆菌的终止子可以分为不依赖于 p 因子和依赖于 p 因子两大类。不依赖于 p 因子的终止子结构特点：1，位于 位点上游一般存在一个富含 GC 碱基的二重对称区，由这段 DNA 转录产生的 RNA 容易形成发卡式结构。2，在终止位 点前面有一端由 4—8 个 A 组成的序列，所以转录产物的 3’端为寡聚 U。依赖于 p 因子的终止子的结构特点：
15、真核生物的原始转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟的 mRNA，以用作蛋白质合成的模版。
答：1，装上 5′端帽子；2，装上 3′端多聚 A 尾巴；3，剪接：将 mRNA 前体上的居间顺序切除，再将被隔开的蛋白质编 码区连接起来。剪接过程是由细胞核小分子 RNA 参与完成的，被切除的居间顺序形成套索形；4，修饰：mRNA 分子内 的某些部位常存在 N6-甲基腺苷，它是由甲基化酶催化产生的，也是在转录后加工时修饰的。
16、什么是 RNA 编辑？其生物学意义是什么？
 答：RNA 编辑是指某些 RNA 特别是 mRNA 前体经过插入、删除或取代一些核苷酸残疾等操作，导致 DNA 所编码的遗 传信息的改变，使得经过 RNA 编辑的 mRNA 序列发生了不同于模版的 DAN 的变化。生物学意义：1，校正作用，有些 基因在突变的途中丢失的遗传信息可能通过 RNA 的编辑得以恢复；2，调控翻译，通过编辑可以构建或去除其实密码子 和终止密码子， 是基因表达调控的一种方式； 扩充遗传信息， 3， 能使基因产物获得心得结构核功能， 有利于生物的进化。
17、遗传密码有哪些特性
遗传密码的基本特点：
   1）、无标点符号，即两种密码子之间无任何核苷酸或其它成分加以分离；
   2）、一般情况下遗传密码是不重叠的，即碱基的使用不发生重复。但在少数大肠杆菌噬菌体的基因组中，部分基因的遗传密码却是重叠的。
   3）、密码子有兼并性(degeneracy)，一种氨基酸有几个密码子，或者几个密码子代表一种氨基酸的现象称为密码子的兼并性。除了Met和Trp只有一个密码子外，其它氨基酸均有二个以上密码子，例如Arg有6个密码子。
4）、密码子的摆动性：即密码的第一、第二碱基是必需严格按标准配对(A-U、G-C)而第三碱基配对可以有一定程度的摆动灵活性。
5）、共有64个密码子，其中AUG不仅是Met的密码子，也是肽链合成的起始密码子；UAA、UAG和UGA为终止密码子，不代表任何氨基酸。
６）、密码子具有方向性，即mRNA从5‘端到3’端的核苷酸排列顺序就决定了多肽链中从N端到C端的氨基酸排列顺序。
７）、密码子是近于完全通用的，所谓密码的通用性是指不论是病毒、原核生物还是真核生物可共用同一套密码。
18、有几种终止密码子？他们的序列和别名是什么？
  3种，UAA\UAG\UGA 别名是无意义密码。
19、tRNA在组成和结构上有哪些特点
虽然tRNA分子各自的序列不同，但所有的tRNA都具有共同的特征：存在经过特殊的修饰碱基，tRNA的3’端都以CCA-OH结束，该位点是tRNA与相应氨基酸结合的位点。1、tRNA的一级结构:tRNA一般由73-93个核苷酸组成，其中有15-16个核苷酸为固定核苷酸，即在绝大多数tRNA上这些核苷酸的种类和位置不变。tRNA一般有10-15个稀有碱基，如假鸟苷（ψ），各种甲基化的嘌呤和嘧啶核苷，二氢尿嘧啶(DHU)等。这些稀有碱基的功能不十分清楚。2、tRNA的二级结构——三叶草结构: 1)二氢尿嘧啶环(D环) (2)反密码子环(3)额外环或可变环(4) TψC环：由7个不配对的碱基组成，几乎总是含5‘GTψC3’序列。(5) 3‘端含CCA-OH序列：称为氨基酸接受茎。3、tRNA的三级结构—— "倒L形"：(1) 氨基酸接受臂CCA序列和反密码子处于倒L的两端。(2) D环和TψC环形成了倒L的角。(3) 绝大多数形成的三级结构的氢键涉及的碱基种类不同于标准的A-U和G-C碱基对；还有少数三级结构反应涉及核糖体-磷酸骨架中的基团，包括核糖的2‘OH基。不同tRNA仅在倒L形的角有轻微改变，说明此拐角区也许是可伸屈的，允许tRNA在执行不同功能时改变其构象。  
20、什么是SD序列？其功能
在mRNA分子中起始密码子的上游8-13个核苷酸处有一段富含嘌呤核苷酸的顺序，它可以与30S亚基中的16SrRNA3'端富含嘧啶的尾部互补，形成氢键结合，因此有助于mRNA的翻译从起始密码子处开始。上述mRNA分子的序列特征1974年由J.Shine和L.Dalgarno发现，故称为SD序列。后来在E.coli的多种mRNA分子中证实均存在SD顺序。
21、什么是信号肽？它在序列组成上有哪些特点？有什么功能
绝大多数被运入内质网内腔的蛋白质都具有大约１５－３０个氨基酸的N端信号序列——信号肽，①其靠近N端常常有1个或数个带正电荷的赖氨酸和精氨酸；②后半段一般带有约10-15个疏水氨基酸。③C-末端靠近蛋白酶切割位点处带数个极性氨基酸。信号肽是启动蛋白质转录的一段多肽。
22、蛋白质有哪些翻译后的加工修饰
(一)氨基末端的 fMet或 Met的切除（二)肽链的折叠(三) 氨基酸残基的修饰（四)  切去一段新生肽链中不是功能所需的肽段
23、如何理解PCR扩增的原理和过程。
答：原理：DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。
过程：1，变性，将DNA在临近沸点的温度下加热使变性，双链打开；2，退火，引物与模版的相结合；3，链的延伸，DNA合成。
24、SNP作为第三代遗传标记的优点是什么？
答：(1) SNPs在基因组中的相对高频分布，非常适合用于关联分析。
(2) SNP在人群中是二等位基因性的，在任何人群中其等位基因频率都可估计出来；
(3) 与串联重复的微卫星位点相比，SNP是高度稳定的，尤其是处于编码区的SNP(cSNP)，而前者的高突变率容易引起对人群的遗传分析出现困难；
(4) 部分位于基因内部的SNP可能会直接影响产物蛋白质的结构或基因表达水平，因此，它们本身可能就是疾病遗传机制的候选改变位点；
(5)易于进行自动化、规模化分析，缩短了研究时间。
25、简述RNAi技术在分子生物学领域的应用前景和存在的问题
RNAi技术利用双链小RNA高效、特异性降解 细胞内同源mRNA从而阻断靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。RNAi的命名来源于安德鲁•法尔1998年在《自然》杂志上的 论文。
研究发现，双链RNA是RNAi的触发物，引 发与之互补的单链RNA（ssRNA, single- stranded RNA）的降解。
经过Dicer（一种具有RNAase III活性的核酸 酶）的加工，细胞中较长的双链RNA（30个核苷酸以上）首先被降解形成21～25个核苷 酸的小分子干扰核糖核酸（siRNA，short interfering RNA ），并有效定位目标 mRNA。
siRNA是引发转录后基因沉默中序列特异性 RNA降解的重要中间媒介，它具有特殊的结 构特征，即5’端磷酸基团和3’端的羟基，其 两条链的3’端各有两个碱基突出于末端。
由siRNA中的反义链参与指导合成被称为 RNA诱导的沉默复合体（RISC）的核蛋白 体，再由RISC介导切割目的mRNA分子中与 siRNA反义链互补的区域，从而实现干扰靶 基因表达的功能。
26、简述乳糖操纵子的调控模型
① Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码
② 这个mRNA分子的启动子紧接着O区，而位于I与O之间的启动子区（P），不能单独起动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。
③ 操纵基因是DNA上的一小段序列（仅为26bp），是阻遏物的结合位点。
④当阻遏物与操纵基因结合时，lac mRNA的转录起始受到抑制。
⑤诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵基因结合，从而激发lac mRNA的合成。当有诱导物存在时，操纵基因区没有被阻遏物占据，所以启动子能够顺利起始mRNA的合成。
27、什么是弱化作用？
弱化作用：当色氨酸达到一定浓度、但还没有高到能够活化RNA使其起阻遏作用的程度时，产生色氨酸合成酶类的量已经明显降低，而且产生的酶量与色氨酸浓度呈负相关。