微生物学

绪论：

1.微生物的定义：指一般肉眼看不见或者看不清的微小生物的总成

2.分类：①原核：细菌，放射菌，蓝菌，支原体，立克次氏体和衣原体②真核：真菌（酵母菌、霉菌、蕈菌），原生动物，显微藻类  ③非细胞类：病毒和亚病毒（类病毒，拟病毒，朊病毒）

3.微生物的特点：①小（体积微小）微米级：光学镜     纳米级：电子镜     

 ②简（结构）单细胞，简单多细胞，非细胞   ③低（进化地位低）原核，真核，非细胞类病毒、亚病毒

4.发展史：①史前期（朦胧阶段）  ②发展期（形态描述阶段）  ③初创期（生理研究阶段）  ④奠基期（生化研究阶段）  ⑤发展期（分子生物学阶段）

5.微生物与人的关系：医疗保健、工业、农业、生产、环保

①与工业的关系：a.食物罐藏防腐   b.酿造工作   c.纯种厌氧发酵的建立

d.液体的深层通气搅拌大规模培养技术的创建      f.代谢调控发酵技术

②与农业大作用：a.以菌治害虫和以菌治植病的生物防治技术   b.以菌增肥效和以菌促长的微生物增产技术    c.以菌作饲料和以菌当蔬菜的单细胞蛋白和食用菌生产技术   d.以菌产沼气等生物能源技术

③与环保的关系：a.促进许多重大问题的突破   b.促分子生物学的三大来源和技术之一   c.刺进经典遗传学发展为分子遗传学   d.微生物与基因工程

6.微生物的五大共性：

①体积小，面积大  ②吸收多，转化快   ③生长快，繁殖快  ④适应强，易变异   ⑤分布广，种类多

第一章

1.细菌：是一类细胞细短，结构简单，胞壁坚韧，多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物

2.细胞的形态可分为三类：球状，杆状，螺旋状

3.细菌的鉴别染色法——革兰氏染色法步骤：涂片固定→结晶紫初染1min→碘液媒染1min→95%乙醇脱色0.5min→番红复染1min              

     阳性菌（G+)→紫色           阴性菌(G-)→红色

4.细菌细胞壁的化学组成与结构：肽聚糖单体、网状结构；

5.革兰氏阳性菌的细胞壁：由肽聚糖和磷壁酸组成

6.磷壁酸：占40%革兰氏阳性菌所特有成分七主链由数十个磷壁酸苷油或磷壁酸核糖醇组成有的还有D-Ala和还原糖所组成的侧链

7.磷壁酸的特点：①通过分子上的大量负电荷浓缩细胞周围的Mg2+，以提高细胞膜上一些合成酶的活力   ②储藏元素  ③调节细胞内自溶素的活力，借以防止细胞因自溶而死亡，作为噬菌体的特异性吸附受体   ④赋予G+细菌特异的表面抗原，因而可用于菌种鉴定   ⑤增强某些致病菌对宿主细胞的粘连，避免被白细胞吞噬，并有抗补体（一种酶）的作用

8.外壁层：位于肽聚糖层的外部，包括脂多糖，外膜蛋白，磷脂

9.脂多糖（Lps）的功能：①革兰氏阴性菌的致病物质-内毒素的物质基础

②与磷壁酸相似，吸附二阶阳离子以提高这些离子在细胞表面浓度

③由于Lps的多样决定革兰氏阴性菌表面抗原决定簇的多样性

④噬菌体吸附位点

10.古生菌（古细菌或谷菌）：细胞壁含假肽聚糖

11.革兰氏染色的原理：

革兰氏阳性菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透明性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，放保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上，呈紫色

革兰氏阴性菌：肽聚糖层薄，交联疏松乙醇脱色不能使其结构放缩，其脂含量高，乙醇酱脂溶解，缝隙大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，呈红色

12.缺壁细菌：L型细菌和支原体可遗传

13.聚β-羟丁酸颗粒（PHB）：

①概念：为碳源储存物   ②功能：储存能量，碳源，可降低渗透压   ③功用：具有无毒，可塑和易降解等特点，可用于造医用塑料，克服白色污染

14.质粒特点：①可自我复制，稳定遗传，对生存不是必要的，复制与染色体分开但同步进行   ②不同质粒携带不同遗传信息   ③无质粒细菌可通过结合，转化，转导方式获得，不能自发产生

15.细菌DNA：放射自显影下2-4μm长的E.coli其DNA长1-1.4μm无组蛋白与精氨亚精氨结合，故有稳定性和柔软性

16.细菌细胞的特殊结构：

①糖被：a.包被与某些细菌细胞壁外的一层厚度补丁的透明胶状物质

        b.种类：微荚膜：＜0.2μm，与细胞表面牢固结合

              荚膜：＞0.2μm，与菌表面结合松弛振荡离心可得

              粘液层：与菌表面结构松弛，可向菌的周围扩散，增大粘性

              菌胶团：多个细菌共有一个荚膜

         c.荚膜的观察：光镜，复染色，特殊染色

         d.荚膜的组成：糖被的成分一般是多糖，少数是蛋白质或多肽也有多太多糖复合型

17.鞭毛：生长在某些细菌表面的长丝状，波曲的蛋白质附属物

18.鞭毛的结构：由鞭毛丝，钩状鞘基本组成

19.鞭毛的活动：靠鞭毛丝旋转而动动力为原质子的力，与膜内外质子浓度差和电势决定

20.“栓菌”实验：即设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢固“栓”在载玻片上然后再光镜下观察细胞行为，结果该菌只能不断打转而未作伸缩运动，故旋转轮正确

21.性菌毛：性状介于菌毛和鞭毛之间，传递遗传信息

22.芽孢：某些细菌长到一定阶段以后，细胞内形成的圆或卵圆形的内生孢子，是对不良环境有较强抵抗力的休眠体

23.芽孢特性：①多层膜结构通透性很差   ②组分：水分小（5%），DPA，富含疏水性角蛋白   ③抗性强：热，酶解，辐射，药物   ④休眠体新陈代谢几乎停止，一个芽孢产生一个个体

24.芽孢意义：①鉴定价值：不同芽孢的大小，位置，形状不同  ②作为无菌标准

25.伴胞晶体：少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时会在孢子旁形成一颗菱形，方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体。功用：环保生物农药

26.细胞的繁殖方式：①裂殖a.二分裂  b.三分裂  c.复分裂     ②芽殖

27.放线菌：是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物

28.放线菌的形态构造：①菌体为丝状单细胞，其大小，粗细与细菌相同

②有多核体，为拟核，与细菌相同    ③细胞壁组分为肽聚糖，对溶解酶敏感

29.放线菌的繁殖：①细胞膜内陷，再由外向内逐渐收缩最后形成完整的横膈膜，从而把孢子丝分割成许多分生孢子    ②细胞壁和膜同时内陷在逐步向内溢缩，最终将孢子丝溢裂成一串分生孢子

30.蓝细菌：旧名蓝藻或蓝绿藻，是一类进化历史悠久的细菌，革兰氏阴性菌，无鞭毛含叶绿素a，能进行产氧性光合作用的大型原核生物

31.蓝细菌的特点：①营养特点：蓝细菌含叶绿素能像植物一样进行产氧的光合作用，利用日光作为能源同化CO2为细胞有机物     ②运动特点：蓝藻无鞭毛，不能运动但能滑行   ③繁殖特点：单细胞蓝藻以二分分裂方式繁殖，丝状体的蓝细菌断裂成藻殖段进行裂殖。全部是无性生殖

32.支原体：是一类无细胞壁，介于独立生活和细胞内寄生生活的最小原核生物

33.支原体特点：①细胞微小，多数为250nm左右，故光镜下勉强可见

②细胞膜含甾醇，较其他原核生物的膜更坚韧   ③无细胞壁，革兰氏阴性菌且形态易变，对渗透压较敏感    ④菌落小（直径0.1-1.0nm）在固体培养基上形“油煎蛋”形   ⑤以二分裂或出芽等方式繁殖   ⑥能再含血清，酵母膏和甾醇等营养丰富的培养基上生长    ⑦多数能以糖类作为能源，能再有氧或无氧条件下进行氧化或发酵形代谢    ⑧基因组很小，0.6-1.1mb左右   ⑨能对抑制蛋白质生成的抗生素（四环素，红霉素）和破坏含甾体的细胞膜抗生素（两性霉素）都很敏感

34.立克次氏体：（斑疹伤寒）是一种专性寄生于真核细胞的革兰氏阴性菌原核生物

35.衣原体：是一类真核细胞内专性能量寄生的小型革兰氏阴性菌原核生物

36.衣原体分类：①鹦鹉热衣原体   ②沙眼衣原体   ③肺炎衣原体原菌

第二章

1.真核微生物的细胞结构：①细胞壁：真菌细胞壁的主要成分是多糖，低等真菌是纤维素为主，酵母菌是葡聚糖为主，高等陆生真菌是几丁质为主，藻类是纤维素    ②鞭毛与纤毛：鞭毛：形态较长，数量较少       纤毛：形态较短，数量较多   ③细胞膜：酿酒酵母中含有固醇类（甾醇），VitD的前体-麦角固醇，在原核生物罕见

2.真核微生物：是一大类细胞核具有核膜，能进行有丝分裂，细胞质中存在线粒体或同时存在叶绿体等多种细胞器的生物，包括真菌，显微藻类，原生动物

3.微体：单层膜包裹的细胞器含过氧化氢酶和氧化酶（又称过氧化物酶体）

4.酵母菌的主要繁殖方式：无性繁殖（芽殖、裂殖、无性孢子）营养体只能以二倍体形式存在

5.酵母菌菌落：①典型的酵母菌都是单细胞真核微生物，细胞间没分化

    ②在固体培养基表面，其菌落一般呈现较湿润，较透明，表面较光滑，容易挑起，菌落质地均匀正反面以及周边与中央部分颜色较一致的特点

6.菌落固体培养基特征：大，圆形，光滑润湿，粘性，颜色单调

7.霉菌：是丝状真菌（菌丝的特化形式）的一个俗称，气生菌丝特化成子实体

8.子实体的类型：①简单子实体：产生无性孢子的子实体类型   ①分生孢子头（青霉）   ②孢子囊（曲霉）产生无性孢子的子实体类型，如担子菌的担子   ②复杂子实体：产生无性孢子的结构复杂的子实体有份生孢子器，分生孢子座，分生孢子盘等结构，能产有性孢子的，结构复杂的子实体

9.真菌的孢子：真菌的繁殖：无性或者有性孢子来完成。特点：小，轻，干，多，以及形态色泽各异，休眠性强和有较强的抗逆性

10.霉菌的菌落特点：形态较大，质地疏松，外形干燥，不透明，呈现或松或紧的蛛网状，绒毛状，棉絮状或毡状

11.蕈菌：常指能形成大型肉质子实体的真菌蕈菌菌丝的分化分成五个阶段：①形成一级菌丝   ②形成二级菌丝（锁状联合）  ③形成三级菌丝   ④形成子实体  ⑤产生担子孢子

12.锁状联合：即形成喙形突起儿联合两个细胞的方式不断是双核细胞分裂，从而使菌丝间断不断向前延伸

第三章

1.病毒的特性有：①体型极其微小   ②无细胞结构   ③每种病毒只含有一种核酸   ④既无产能酶系，也无蛋白质和核酸合成酶系    ⑤以核酸蛋白质等“元件”的装配实现其大量繁殖   ⑥离体条件下，能以无生命的生物大分子状态存在，并能长期保持其侵染性   ⑦对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感  

⑧有丝病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中并能诱发潜伏性感染

2.最大病毒：牛痘苗病毒      最小病毒：口蹄疫病毒

3.病毒粒（基本成分是核酸和蛋白质）的对称体制：

①螺旋对称 A.无包膜  a.杆状（烟草花叶病毒）  b.丝状（大肠杆菌噬菌体） 

           B.有包膜  a.卷曲状（流感病毒）    b.弹状（狂犬病毒）

②二十面体对称  A.无包膜B.有包膜③复合对称A.无包膜（T偶数噬菌体）

                B.有包膜（痘病毒）

4.病毒的群体形态：①病毒粒大量聚集并使宿主细胞发生病变时，就形成了具有一定形态，机构并能用光镜进行观察的特殊群体    ②动植物病毒细胞中的包涵体，有的还可以用肉眼观察，顾氏小体，天花病毒包涵体内基氏小体，狂犬病毒包涵体，X-体，TMV包涵体。动植物-包涵体，噬菌体-噬菌斑，动物病毒-空斑，植物病毒-枯斑、病斑

5.三类典型形态的病毒及其代表：

 ①螺旋对称代表-烟草花叶病毒a.模式植物病毒  b.螺旋代表的典型

 ②二十面体对称的代表-腺病毒a.腺病毒是一类动物病毒，已发现有100余种

b.侵染哺乳动物或禽类动物

③复合对称的代表-T偶数噬菌体a.E.coli的T偶数噬菌体共有三种，即T2，T4，T6b.病毒学和分子遗传学基础理论研究中的极好材料

6.噬菌体的繁殖：①五个阶段即吸附，入侵，增殖，成熟和裂解  ②凡在短时间内能连续完成以上五个阶段而实现其繁殖的噬菌体，成为烈性噬菌体  ③烈性噬菌体所经历的繁殖过程，成为裂解性周期

7.效价：标示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数，又称噬菌斑形成单位数或感染中心数。常用双层平板法测定

8.噬菌体效价测定一步生成曲线实验设计依据：①一个菌体被一个噬菌体感染，避免二次吸附  ②细菌群体被噬菌体同步感染

9.一步生成曲线三阶段：潜伏期，裂解期，平稳期

10.感染复数：每一个敏感细胞所能吸附的相应噬菌体的数量

11.自然裂解：敏感细胞因超感染复数的病毒的吸附引起的不产生子代病毒的裂解

12.溶源性：温和噬菌体的侵入并不引起宿主细胞裂解，凡能引起溶源性的噬菌体称温和噬菌体，而其宿主即溶源菌

13.温和噬菌体的三种存在形式：①游离态   ②整合态   ③营养态

14.植物病毒：大多数ssRNA病毒基本形态为杆状，丝状和球状，一般无包膜

15.昆虫病毒的种类：核型多角体病毒，质型多角体病毒，颗粒体病毒

16.亚病毒分为：①类病毒：是一类只含RNA一种成分转型寄生在活细胞内的分子病原体，目前只在植物体中发现   ②拟病毒：又称类类病毒，壳内类病毒或病毒卫星，是一直一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒   ③朊病毒（疯牛病）：是一类不含核酸的传染性蛋白质分子