分子生物学复习提纲
一.名词解释
(1)Ori :原核生物基因质粒的复制起始位点,是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。
ARS:自主复制序列,是真核生物DNA复制的起点,包括数个复制起始必须的保守区。
不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。
(2)Promoter:启动子,与基因表达启动有关的顺式作用元件,是结构基因的重要成分,它是位于转录起始位点5‟端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列,能活化RNA 聚合酶,使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。
(3)-independent termination不依赖因子的终止,指在不依赖因子的终止反应中,没有任何其他因子的参与,核心酶也能在某些位点终止转录。(强终止子)
(4)SD sequence:SD序列(核糖体小亚基识别位点),存在于原核生物起始密码AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片段,它与16SrRNA3‟端反向互补,所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。Kozak sequence:存在于真核生物mRNA的一段序列,核糖体能够识别mRNA上的这段序列,并把它作为翻译起始位点。
(5)Operator:操纵基因,与一个或者一组结构基因相邻近,并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用,从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon:操纵子,是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。
(6)Enhancer:增强子,能强化转录起始的序列的为增强子或强化子 Silencer:沉默子,可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。
(7)cis-acting element :顺式作用元件,存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件,本身不编码任何蛋白质,仅仅提供一个作用位点,与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor:反式作用因子,是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域,即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。
(8)Open reading frame (ORF):开放式阅读框架,是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始,到终止密码子结束。
(9)Gene:基因,产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。(能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。)
(10)DNA denaturation:DNA变性,DNA双链的氢键断裂,最后完全变成单链的过程。 Hyperchromatic effect:增色效应,在变性过程中,260nm紫外线吸收值先缓慢上升,当达到某一温度时骤然上升,称为增色效应。复性(Renaturation):热变性的DNA缓慢冷却,单链恢复成双链。 DNA Melting temperature (Tm):DNA溶解温度,变性过程紫外线吸收值增加的中点称为融解温度。生理条件下为85~95℃。
(11) RNA splicing:RNA的剪接,SnRNA形成剪接体,剪接信号为GU(供体)AG(受体)从mRNA前体分子中切除内含子,而使外显子拼接形成成熟mRN
A的过程。 intron :内含子,存在于原始转录产物或基因组DNA中,但不包括在成熟mRNA、rRNA或tRNA中的那部分核苷酸序列。 exon:外显子,基因组DNA中出现在成熟RNA分子上的序列。
(12) RNAi:RNA干涉,是利用双链小RNA的高效、特异性降解细胞内同源mRAN,从而阻断体内靶基因表达,使细胞出现靶基因缺失表型的方法。
(13) polymerase chain reaction (PCR):聚合酶链式反应,是体外酶促合成特异DNA片段的一
种方法,由高温变性(92~97℃)、低温退火(45~55℃复性)及适温延伸(72℃、Taq酶)等几步
反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增。
(14) Southern blot:DNA印迹杂交,指利用具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,
可按碱基互补的原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检
测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限
制图谱,此即DNA印迹杂交。 Northern blot:RNA印迹杂交,首先通过电泳的方法将不同
的RNA分子依据其分子量大小加以区分,然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测
目的片段。 Western blot:蛋白质印迹。通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物
组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织
中的表达情况的信息。
二.简答和问答题
1.RNA的种类和功能
答:mRNA、tRNA、rRNA、反义RNA、snRNA,gRNA等等。①mRNA,信使RNA,功能
就是把DNA上的遗传信息精确无误地转录下来,决定蛋白质的氨基酸顺序,完成遗传信息
传递过程。②tRNA,转运RNA,根据mRNA的遗传密码依次准确地将它携带的氨基酸连
结起来形成多肽链。③rRNA,核糖体RNA,一般与核糖体蛋白质结合在一起,形成核糖
体。④反义RNA,与mRNA互补的RNA分子,从而抑制mRNA的翻译,参与基因表达的调
控。⑤snRNA,小核RNA,是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体的主要成分。
上述各种RNA分子均为转录的产物,mRNA最后翻译为蛋白质,而rRNA、tRNA及snRNA
等并不携带翻译为蛋白质的信息,其终产物就是RNA。⑥gRNA
,引导RNA,真核生物中参与RNA编辑的具有与mRNA互补序列的RNA。
2.DNA半保留和半不连续复制
答:①DNA 半保留复制是:DNA 在进行复制的时候链间氢键断裂,双链解旋分开,每条链
分子生物学试题
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