8.证明遗传物质是核酸的实验依据是什么？①1928年，英国细菌学家Frederick Griffith肺炎链球菌转化实验表明活的无毒R型细菌从死去的有毒S型菌得到了一些什么东西从而使无毒的R型转化成有毒的S型肺炎球菌。②1944年，Avery等体外转化实验用有机溶剂去除蛋白、用胰蛋白酶（trypsin）和胰凝乳蛋白酶（chymo-trypsin）消化蛋白对转化没有影响，但DNA酶消化使转化作用不能发生。说明转化源是DNA。③1952年，美国冷泉港实验室Hershey和ChaseT2噬菌体侵染实验确证了DNA是遗传物质。他们用32

P和35

S分别标记噬菌体的DNA和蛋白质，发现只有DNA进入宿主细菌内，而蛋白质则没有。④1956年A.Gierer和G.Schraman烟草花叶病毒TMV重建实验证明RNA也是遗传物质。

9.设计实验证明DNA的半保留复制？实验方法;将大肠杆菌在15N为唯一氮源的培养基中进行培养，然后将其转入以14

N为氮源的培养基中培养，采用氯化铯密度梯度离心，观察各代培养物的DNA形成区带的位置和比例，根据实验结果对DNA复制的过程进行分析。①将大肠杆菌长期在以15 N为唯一氮源的培养基中培养，得到15

N-DNA-CsCl密度梯度②用14

N为氮源的培养基培养15

N标记的大肠杆菌，经过一代以后，氯化铯密度梯度离心形成一条带，但密度在14 N-DNA和15

NDNA之间，即形成杂合分子14

N-15

N ③两代后，DNA形成两条带，一条带在14N-DNA和15

NDNA之间，另一条在14

N-DNA上④三代后，DNA也形成两条带，位置与子二代相同，但14

N-DNA带变宽。

10有何机制确保DNA复制的忠实性？复制过程的忠实性是保证生物体遗传信息准确传递的一个必要条件，它取决于碱基配对的专一性。①DNA聚合酶可以通过两种方式提高互补碱基选择的专一性。第一，通过专一性识别使即将加入的碱基与模板的碱基严格互补，这种方式用来控制合成前的错误。第二，当发现存在着错配碱基时，可切除新加入的碱基，这种方式叫校对控制。两种方式既可单独起作用，也可共同起作用。②复制过程中碱基配对受双重核对作用控制：聚合酶的选择作用和3’5’外切核酸酶的校正（proofreading）作用。③不同的聚合酶以不同的方式处理聚合与校对的关系。④DNA聚合酶在复制过程中造成的错误除了不正确配对造成的核苷酸取代外，还包括由于插入或缺失额外的核苷酸造成的框架移位。

11.原核生物（以大肠杆菌为例）DNA复制起始的步骤？ 复制起始的两种方式：♦从头起始：DNA链的合成从头开始♦共价延伸：新链从原有的亲链上开始合成，滚环复制就是通过共价延伸起始的。①在ATP的帮助下大约20个DnaA蛋白在ATP的作用下与oriC处的4个9bp保守序列相结合，形成寡聚复合物②在HU蛋白和ATP的共同作用下,DnaA复制起始复合物使3个13bp直接重复序列变性,形成开链③解链酶六体DnaB替换了DnaA与单链DNA相结合(需DnaC帮助),进一步解开DNA双链。

12.简述原核生物转录起始的过程？①全酶与模板的DNA接触，生成非专一的,不稳定的复合物在模板上移动；②起始识别：全酶与－35序列结合，产生封闭的酶-启动子二元复合③全酶紧密地结合在-10序列处，模板DNA局部变性，形成开放的启动子二元复合体；④第一个rNTP转录开始,形成酶-启动子-rNTP三元复合体（ternary complex）。⑤当RNA长约9bp形成稳定的DNA-酶-RNA 复合物、 σ因子释放，结束起始，进入延伸阶段。σ因子释放是起始与延伸的分水岭

13.大肠杆菌有两种类型的终止子（原核生物转录终止的两种机制）①依赖ρ因子的终止子：依赖ρ因子的终止子必须在ρ因子的存在下才能终止核心酶的转录作用。具有使DNA-RNA杂交体解链的作用。它追赶上RNA聚合酶后使DNA-RNA解链，释放RNA聚合酶，使转录终止。②不依赖ρ因子的终止子：只有核心酶和终止子就足以使转录终止，不依赖其他其他辅助因子的作用。不依赖ρ因子的终止子在结构上有两个特征，一个是转录生成的RNA形成发夹结构，二是发夹结构末端紧跟着6个连续的U串。RNA聚合酶在发夹结构处被终止， 6个连续的U串可能为RNA聚合酶与模板的解离提供了信号。

14.比较原核真核转录的差异？①原核只有一种RNA聚合酶，而真核细胞有三种聚合酶；②启动子的结构特点不同，真核有三种不同的启动子和有关的元件；③真核的转录有很多蛋白质因子的介入。④原核生物没有增强子，真核生物有增强子序列对转录进行调控

15.真核生物转录后加工？真核生物转录后加工除了mRNA外，tRNA和rRNA也要经过后加工的过程。⑴rRNA的转录后加工 真核细胞中rRNA的加工途径①切除5′端的前导序列；②从41S的中间产物中先切下18S的片段③ 部分退火，形成发夹结构；④最后修正。⑵mRNA的转录后加工。在真核生物中，几乎所有的成熟mRNA有5’帽子（cap）结构，多数还有3’末端的poly（A）尾巴。这些结构都是在转录后经过修饰的结果。①5’帽子结构。成熟真核生物的mRNA并没有游离的5’端，而是一种被称为帽子的结构。真核生物的帽子结构可归纳为三种：m7GpppX为帽子0；m7GpppXm为帽子1；m7GpppXmYm为帽子2 。帽子结构的作用：♦为核糖体识别RNA提供信号♦增加mRNA的稳定性♦为mRNA向胞质的运输提供信号♦与某些RNA病毒的正链RNA的合成有关。②3’ poly(A)尾巴。多数真核生物（酵母除外）的mRNA 3’末端具有长约200 bp的poly（A）尾巴。poly（ A ）在分子生物学实验中有很大的应用价值：♦ 应用mRNA的该特性，可用寡聚T（oligo dT）为引物，反转录合成cDNA。♦ 将oligo（ dT ）与介质相连，用于从总RNA中分离纯化mRNA。⑶后加工与mRNA的稳定性：转录后加工是产生各种成熟RNA分子的重要过程。各种RNA分子的加工都是在特定的酶参与下完成的，包括核酸内切酶和核酸外切酶。核酸酶除了参与后加工过程外，还负责过剩RNA的降解。⑷剪接可以分为三个阶段进行：第一阶段，内含子的5’端切开，形成游离的左侧外显子和右侧的内含子和外显子分子。左侧的外显子呈线状，而右侧的内含子和外显子并不呈线状。与在距内含子的3’端约30个碱基处有一个高度保守的A，称为分支位点（branching site）。内含子游离的5’端以5’-2’磷酸二酯键与A相连，形成一个套索（lariat）结构。第二个阶段，内含子的3’剪接点被切断而内含子以套索状释放，与此同时右侧外显子与左侧外显子连接在一起。第三个阶段，内含子的套索被切断，形成线状并很快被降解。