9-6 转基因动物的应用，

【1】改良动物品种【2】生物制药【3】建立诊断和治疗人类疾病的动物模型【4】生产可用于人体器官移植的动物器官【5】基因治疗【6】基因打靶

9-7动物乳腺生物反应器的制备

【1】表达载体的构建【2】目的基因的选择【3】体外重组【4】基因转导【5】胚胎移植【6】鉴定，转基因动物乳腺生物反应器可以从分子水平和乳腺分泌物两个方面鉴定

10-1  什么是染色体工程？动物染色体工程主要包括哪些方面？

是按照人们的需要对生物的染色体进行操作，添加，消减或者替换染色体，从而达到定向选育新品种或者创造人工新物种的目的，动物染色体工程主要包括染色体倍性改造，结构改造及人工染色体的利用。

10-2  动物染色体加倍技术主要有哪些？

 【1】化学诱导法；利用秋水仙素，细胞松弛素，麻醉剂N2O【2】物理方法；温度休克法，水静压法【3】生物学方法；通过杂交技术

11-1   结合细胞工程的发展，全面分析和理解细胞学说和植物全能性理论的意义？

细胞工程发展史：

1839年，施莱登和施旺发现了细胞学。1902年，Haber labdt提出了细胞全能学说。1958年，Stwovrd有胡萝卜韧皮部组织诱导生成再生植株。1907年，Harrison创立动植物的组织培养技术。

植物细胞的全能性：植物体的一部分组织或者器官具有发育成完整植株的潜在能力，称之为植物细胞的全能性。植物全能性理论是植物细胞工程的理论基础。

11-2 愈伤组织有什么特点？它在植物细胞工程中有什么作用？

脱分化后的细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团。愈伤组织的诱导是植物细胞体外再生的第一步。也是关键的一步。

11-3  愈伤组织形成再生植株需要经过什么途径？

要经过器官的发生和胚状体发生两条途径。器官的发生是由愈伤组织首先在一种培养基生诱导形成的芽（或根），再在另一种培养基上诱导形成根（或芽）。胚状体发生是由愈伤组织形成类似种子的胚的结构，同时产生芽端和根端的结构，称为胚状体。

11-4  分析影响植物组织脱分化和再分化的因素？

内部因素：包括植物的遗传性状和生理状况，外部因素：包括营养条件（如植物激素，无机盐，有机营养成分）和环境条件（如培养基的PH，渗透压，温度，湿度，光照）

11-5 植物组织培养基的组成成分有哪几类？在离体培养中的功能是什么？

【1】无机营养成分。如镁是叶绿素分子的一部分，钙是细胞壁的组成之一，氮是各种氨基酸，维生素，蛋白质和核酸的重要组成部分。【2】有机营养成分。碳源，含氮物质

【3】 植物激素类，生长素类，细胞分裂素类，赤霉素类【4】琼脂 它是培养基中的一种必需成分【5】PH值在灭菌之前培养基的PH值一般都调节到5.0～6.0

11-6 分析植物离体培养的环境条件及对培养的影响？

环境的影响主要有：【1】光的影响：光对培养基所产生的影响是不同的，在烟草细胞培养物中泛醌的合成不受光的影响，【2】温度的影响：不同植物细胞培养物的生长和次生产物的合成对温度有一定的要求。【3】振荡的频率：摇床的振荡频率对细胞培养物的生长和代谢物的积累都会产生影响。

11-13植物几种大规模培养系统各有什么特点？

12-1什么是植物快繁技术？总结其主要的操作步骤。

利用组织培养技术，将优良植株的茎尖，腋芽，叶片，鳞片等器官，组织和细胞进行离体培养，在短时间内获得大量遗传性一致的植株的技术称为植物的快繁技术。其主要的操作流程包括无菌母株的制备，不定芽增殖，完整植株的形成，再生植株的锻炼和驯化及再生植株的鉴定等步骤。

12-2植物脱毒方法有哪些？

有微茎尖培养法，株心组织培养法，热处理法

13-1通过离体培养获得单倍体的途径有哪些？

通过离体培养花药和花粉，是离体培养获得单倍体的主要途径

13-2 花药培养中再生植株的形成途径与再生植株倍性有何关系？

花药再生植株有两种方式：【1】花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再分化形成植株，【2】胚状体再生，即花药中的花粉通过形成胚状体，发育成单倍体植株，在花药培养中，花药中的花粉最容易形成胚状体或愈伤组织，但是，有时花药的体细胞也可以分裂繁殖，因此，体外花药培养除了得到小孢子来源的单倍体植物，还会的到花药体细胞来源的二倍体植株。

13-3  花粉培养过程

花粉培养是指把花粉从花药中分离出来，以花粉粒作为外植体进行离体培养的技术。

13-4花药与花粉培养的方法

13-4-1材料如何选择

【1】材料的遗传差异【2】母本生理状态的影响【3】花粉发育时期

13-4-2 材料的预处理

【1】低温处理【2】高温处理【3】离心处理【4】激光照射【5】乙烯利处理【6】甘露醇处理

13-4-3培养基

基本培养基，【1】碳源【2】激素【3】附加成分

13-4-4，接种与再生植株的培养

【1】材料的灭菌处理【2】培养条件【3】花粉的培养【4】花粉植株的鉴定【5】单倍体植物的染色体加倍

14-1  植物胚乳有哪些类型？

植物胚乳可以分为两大类：被子植物胚乳和骡子植物胚乳。胚乳发育初期是否形成细胞壁可分为：【1】核型胚乳【2】细胞型胚乳【3】沼生目型胚乳

14-2  植物胚胎培养的定义和发展

植物胚胎培养包括：胚培养，胚珠培养，子房培养和胚乳培养。胚培养包括成熟胚培养和幼胚培养。1904年Hanning培养罗卜和辣根菜的胚，Laibach在1925年～19289年培养亚麻种间杂种幼胚成功的获得了种间杂种，首次证实了这种方法在实际应用中的价值

14-3   胚培养的意义？

1克服了远源杂交不孕和幼胚败育2成熟胚培养快速繁殖3胚培养作为转基因受体材料

15-1 愈伤组织与体细胞胚胎发生

愈伤组织原来是指植物受损时在愈合伤口处长出的一团瘤状突起，突起内的细胞已发生脱分化的变化，培养中的愈伤组织是指从外植体的内部或切口表面形成的一团没有分化的均匀一致，无序生长的薄壁细胞团。这种组织具有再分化能力。

愈伤组织的形成大致要经过起动期，分裂期，形成期三个阶段。

愈伤组织器官的发生：【1】不定芽方式：是指愈伤组织培养物，通过形成不定芽的再生植株，【2】胚状体的形成，是指培养的组织或细胞中直接或间接形成胚胎的生长方式。

15-2人工种子

就是将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中而制成的，在条件适宜时他同普通种子一样可以发芽成苗。人工种子包括：体细胞胚，人工胚乳，人工中皮。

15-3人工种子的研究现状

【1】人工种子结构完整，体积小，便于储藏和运输。【2】供制作人工种子的体细胞胚数量多，繁殖快【3】制作人工种子时还可以加入菌肥，微生物，农药，以抵抗外来病毒和微生物的侵染，【4】对生育周期长的多年生植物，育性不良的且难于有性繁殖的植物可用人工种子技术进行繁殖，【5】不受季节限制，利用人工种子技术大量，快速繁殖性状优良，遗传稳定的植物品种。【6】人工种子和天然种子一样，具有坚硬的种皮，适用机械化播种。

16-1植物原生质体的制备方法有哪些？

【1】机械分离法；常用于分离藻类原生质体，细胞在高渗糖溶液中发生轻微质壁分离，原生质体收缩成球形后，再用机械法磨碎组织，原生质体也从受损的细胞壁中释放出来。

【1】   酶解分离法 ：用纤维素酶，半纤维素酶，果胶酶，R——10，蜗牛酶等细胞壁降解酶，脱除植物细胞壁，获得原生质体的方法。

16-2  为什么说原生质体培养系统是现在生物技术的载体？

植物原生质体融合的最大意义在于能克服种，属以上的植物有性杂交不亲和性障碍，为广泛重组遗传物质开辟了新的途径。、

16-3  体细胞融合的意义？

体细胞融合的最大意义在于能克服种，属以上的植物有性杂交不亲和性障碍，为广泛重组遗传物质开辟了新的途径。

16-4植物原生质体融合技术

植物原生质体融合技术有『1』盐类融合法，最早应用的原生质体融合方法，常用的盐类融合剂有：硝酸盐类，氯化物类，葡聚糖硫酸盐类『2』高钙离子高PH融合法『3』聚乙二醇融合法（PEG）『4』PEG,高钙离子，高PH相结合的融合法『5』电融合法

17-1 植物染色体的人工诱导加倍的常用的化学方法有哪些？

常用语人工诱导加倍的化学药剂有：秋水仙素，细胞松弛素B，富民农

17-2   染色体的削减

从细胞中去掉一条染色体，则染色体数成为2n-1.这样的植物称单体植物。这一技术称为染色体的削减。从细胞中去掉两条染色体，则染色体数变成2n-2.如果去掉的是同源染色体，这样的植物称为缺体植物，如果去掉的是非同源染色体，则称为双单体植株，

18-1  常用的基因转化技术有哪些？

有目的基因的克隆，外源基因的导入和转基因植物的再生

18-2 简述根瘤菌农杆菌进行基因转导的步骤及其原理？

农杆菌介导的转化过程大致可以分为三个步骤：【1】农杆菌对植物细胞表面特定部位的识别和附着。【2】T-DNA进行复制和转移【3】T-DNA的整合。

18-3  基因枪介导基因转化有何特点？

利用火药爆炸或高压气体加速（这一加速设备称为基因枪）将包裹了DNA的直径约1-4纳米的球状金粉或钨粉颗粒直接送入完整的植物组织和细胞中，优点是：不收受体植物范围的限制，而且其载体质粒的构建也相对简单。

18-4  植物基因转化的方法有哪些？

植物基因转化的方法可以分为生物学方法介导的基因转移和非生物学方法介导的基因转移，生物学介导的基因转移包括：农杆菌介导的基因转移，植物病毒介导的基因转移，非生物学方法：PEG（也称化学介导转化法），电击，显微注射，脂质体，超声波，基因枪等方法介导的基因转移。