6、脂双层膜的流动性主要取决于磷脂的       与       。
7、琥珀酸脱氢氧化生成       。
8、糖蛋白中O糖肽键是指糖与蛋白质的       。
9、大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ是一个多功能酶，除了聚合活性外，还兼有下列两种酶活性       和       。
10、一个tRNA的反密码子为IGC，根据简并原则，它可识别的密码子是       、       、       。
11、细菌的DNA螺旋酶是一种类型Ⅱ的拓扑异构酶，它可以连续引入       到双链闭环DNA分子中去，反应需要由ATP供给能量。在无能量供应时它可起       作用。
12、致癌RNA病毒和肝炎DNA病毒都含有      酶，它们的复制过程，前者为      后者为      。
四、问答题：5题，共30分。
1、指出从分子排阻层析柱上洗脱下列蛋白质时的洗脱顺序，为什么？分离蛋白质的范围是5000到400000。A。肌红蛋白（分子量16900Da）B。过氧化氢酶（247500Da）C。细胞色素C（13370Da）D。肌球蛋白（500000Da）E。胰凝乳蛋白酶原（23240Da）F。血清清蛋白（68500Da）
2、简要说明可用于判断和确定酶活性中心的一些主要方法。
3、试用少于100字描述线粒体F1-ATP酶的催化机制的特点。
4、转录后加工是基因表达中一个非常重要的步骤，试举出六种RNA水平的加工方式。
5、简要说明细胞内蛋白质选择性降解的作用机制。
中科院2000年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、-2、+3、-4、+5、-6、-7、+8、-9、+10、-11、-12、+13、+14、-15、-16、-17、+18、+19、-20、-
二、选择题
1、C；2、B；3、B；4、A；5、C；6、A；7、B；8、C；9、D；10、C；11、B；12、D；13、C；14、B；15、C；16、C；17、B；18、D；19、C；20、D；21、B；22、C；23、A；24、B；25、D。
三、填空题
1、2.2；2、氢键、范德华力、甘氨酸；3、解离状态；4、底物类似物、潜伏共价修饰酶的基团存在；5、疏水性、活性；6、脂肪酰链的长度、脂肪酰链的不饱和度；7、延胡索酸；8、丝氨酸/苏氨酸残基、天冬酰胺残基；9、3’→5’核酸外切酶、5’→3’核酸外切酶；10、GCA、GCC、GCU；11、负超螺旋、松弛负超螺旋；12、RNA→DNA→RNA、DNA→RNA→DNA。
四、问答题
1、凝胶过滤时，大分子不能进入分离介质，故而先被洗脱。因此，这组蛋白质洗脱的顺序是：D、B、F、E、A、C。注意：分离分析柱应有一定的分离效率，否则，A和C不易分离。
2、首先，可以通过酶的最适PH推断有哪些可电离的基团存在于酶的活性部位。其次，可以通过一些常用的化学修饰试剂处理酶制剂，观察酶是否失活。然而，应该注意的是需同时观察处理后酶的立体结构是否发生变化，以便了解是由于修饰引起了蛋白质变性而导致酶失活，还是有关活性部位中的氨基酸残基被修饰的结果。第三，在知道了酶的氨基酸序列后，一方面可以利用生物信息的方法，与同源的蛋白质进行比较，得到信息；还可以通过定点突变的方法改变某些氨基酸残基。第四，如果能得到酶与底物复合物的晶体，进行X射线衍射研究，则可以得到更为直接的结论。
3、F1-ATP酶γ与е亚基在α3β3的中央结合形成“转子”，共同旋转以调节β三个亚基催化位点的开放和关闭，g亚基的顺时针与逆时针分别与ATP的合成和水解相关联。F1-ATP酶直径小于12nm，能产生大于100pN的力，无载荷时转速可达17转/秒。F1-ATP酶与纳米机电系统（nanoNEMS）的组合成为新型纳米机械装置。
4、RNA水平上后加工的方式有：⑴剪切——除去有内含子转录得到的间插序列⑵编辑——某些生物需要改变原来的编码信息⑶修饰——许多功能RNA，尤其是tRNA含有修饰核苷酸⑷5’加帽——只要指真核生物mRNA的5’帽子结构⑸3’结尾——如真核生物mRNA的聚腺苷酸尾⑹剪切——通常转录得到的初级转录产物是分子很大的RNA前体，需要经过许多酶切才能到到一定长度的功能RNA分子。
5、在细胞质内存在一个蛋白酶体，它的功能是降解那些被认为应该被降解的蛋白质或肽链，也被称为“宣布无用的蛋白质”。这样的蛋白质包括新生肽链错误折叠的产物、一些已经完成“任务”的短寿命的蛋白质等。它们的讲解过程不同于溶酶体中蛋白质的降解，即不是直接被蛋白酶水解，而是现被标记，注明是应该被降解的蛋白质。这些被降解的蛋白质的标记过程是一个需能反应，在3个酶——遍在蛋白活化酶、遍在蛋白携带蛋白、遍在蛋白-蛋白连接酶的作用下，这些“宣布无用的蛋白质”中某些赖氨酸的e氨基与遍在蛋白形成异肽键。然后，在蛋白酶体中降解。
中科院2001生化与分子
一.是非题，每题1分，共25分。答“是”写“+”，答案“非”写“一”。
1. 所有α氨基酸中的α碳原子都是一个不对称的碳原子( )
2. 蛋白质的四级结构可以定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合( )
3. 根据凝胶过滤层析的原理,分子量愈小的物质,因为愈容易通过,所以最先被洗脱出来( )
4. 两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起,组成有特殊的几何排列的局部空间结构,这样的结构称为超二级结构,有称为模体(MOTIF)( )
5. 抑制剂不与底物竞争酶结合部位,则不会表现为竞争性抑制( )
6. 酶反应最适PH不仅取决于酶分子的解离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( )
7. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子( )
8. 糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转( )
9. 线粒体内膜ADP-ATP载体蛋白在促进ADP由细胞质进入完整线粒体基质的同时ATP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的( )
10. 脂质体的直径可以小到150nm( )
11. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧( )
12. 雄性激素在机体内可变为雌性激素( )
13. CoA,NAD和FAD等辅酶中都含有腺苷酸部分( )
14. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤( )
15. RNA连接酶和DNA连接酶的催化连接反应都需要模板( )
16. DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物( )
17. 真核生物mRNA两端都含有3'-OH.( )
18. 在细菌中RNA聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调节系统( )
19. 所有氨酰-tRNA合成酶的作用都是把氨基酸连接在tRNA末端核糖的3'-羟基上( )
20. 核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都不会被化学修饰( )
二.选择题(20题，每题1分，共20分)
1. 绒毛膜促性激素是一种：    
A. 甾醇类激素   B. 脂肪酸衍生物激素   C. 含氮激素
2,溴化氰(CNBr)作用于：    
A. 甲硫氨酰-X  B. 精氨酰-X   C. X-色氨酸  D. X-组氨酸
3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力：  
A. ATP酶  B. 蛋白质激酶  C. 蛋白水解酶
4.神经生长因子(NGF)的活性分子由下列肽链组成：  
A. αα  B. ββ  C. α2βγ2 
5.胰岛素原是由一条"连接肽"通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的C端和N端,这条"连接肽"称为：
A. A链         B. B链        C. C肽
6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为：
A. Km  B. Vmax  C. Km/Vmax  D. Vmax/Km
7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化,导致该酶：
A. 由低活性形式变为高活性形式  B. 由高活性形式变为低活性形式  C. 活性不受影响
8.底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于：
A. 结合能增大                        B. 增加的结合能被用来降低反应活化能
C. 增加的结合能被用来降低Km          D. 增加的结合能被用来增大Km
9.TGFβ受体具有下列哪一种酶的活性：
A. 酪氨酸激酶       B. 酪氨酸磷酸酯酶     C. 丝氨酸/苏氨酸激酶  D. 腺苷酸环化酶
10.2000年诺贝尔生理学或医学奖予下列哪一个领域的重大贡献有关:
A. 结构生理学      B. 发育生理学       C. 神经生物学      D. 免疫学
11.苍术钳是一种抑制剂,它的作用位点在：
A.钠钾ATP酶B.线粒体ADP-ATP载体C.蛋白激酶C  D.线粒体呼吸链还原辅酶Q-细胞色素c氧化还原酶
12.膜固有蛋白与膜脂的相互作用主要通过：
A. 离子键 B. 疏水键 C. 氢键 D. Van der Waal氏力
13.生物膜的基本结构是：
A. 磷脂双层两侧各附着不同蛋白质      B. 磷脂形成片层结构,蛋白质位于各个片层之间
C. 蛋白质为骨架,二层林脂分别附着与蛋白质的两侧
D. 磷脂双层为骨架,蛋白质附着与表面或插入磷脂双层中
14.辅酶Q是： 
A. NADH脱氢酶的辅基B. 电子传递链的载体C. 琥珀酸脱氢酶的辅基D.脱羧酶的辅酶
15.完整线粒体在状态4下的跨膜电位可达：
A. 1mv     B. 10mv     C. 100mv    D. 200mv
16.基因有两条链,与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做：  
A. 有义链B. 反义链C. 重链D. cDNA链
17.一段寡聚合糖核苷酸TψCGm1Acmm5CC,其中含有几个修饰碱基(非修饰核苷):
A. 3个  B. 4  C. 5  D. 6
18.已知有的真核内含子能编码RNA,这类RNA是：
A. 核小分子RNA(sn RNA)  B. 核仁小分子RNA(sno RNA)  C. 核不均一RNA(hnRNA)
19.别嘌呤醇可用于治疗痛风症,因为它是：
A. 鸟嘌呤脱氨酶的抑制剂,减少尿酸的生成   B. 黄嘌呤氧化酶的抑制剂,减少尿酸的生成
C. 尿酸氧化酶的激活剂,加速尿酸的降解
20.α-鹅膏覃碱能强烈抑制：
A. 细菌RNA聚合酶     B. 真核RNA聚合酶    C. 细菌DNA聚合酶   D. 真核DNA聚合酶
21. 在核糖体上进行蛋白质合成,除了肽链形成本身以外的每一个步骤都与什么有关?
A. ATP的水解       B. GTP的水解        C. Camp的水解     D. 烟酰胺核苷酸参与
22. 基因重组就是DNA分子之间的:
A. 共价连接     B. 氢键连接     C. 离子键连接
23. DNA复制过程中双链的解开,主要靠什么作用：
A. 引物合成酶        B. Dnase I       C. 限制性内切酶         D. 拓扑异构酶
24. 包括中国在内,有很多国家科学家参与的人类基因组计划,到目前为止的进展情况如何?
A. 仅完成23对染色体的遗传图谱和物理图谱  
B. 仅测定了7,10合22号染色体的核苷酸序列
C. 测定了人基因组3X10^9碱基的全序列,但只是一部"天书",无法知道它的全部意义
D. 测定了人基因组全序列,分析了他们代表的遗传信息,已经了解大部分基因的功能
25. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是: 
A. 磷酸吡哆醛  B. 泛酸  C. 烟酰胺  D. 硫氨素
三、填空题(每空一分)
1. 胰岛素最初合成的单链多肽称为__________然后是胰岛素的前体,称为_________
2. 原胶原蛋白分子的二级结构是一种三股螺旋,这是一种____结构,其中每一股又是一种特殊的____结构.
3. 有一类不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_________型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_____
4. "蛋白质组"是指____________________
5. 蛋白激酶A的专一活化因子是Camp,蛋白激酶C的专一活化因子是__________,此外还有某类型的蛋白激酶可以由_______作为专一激活因子
6. 已阐明原子分辨率三维结构的膜固有蛋白有______________,__________________等(仅写两个)
7. 霍乱毒素的受体是一种____________化合物
8. 线粒体内膜催化氧化磷酸化合成ATP的F1F0酶的F1部分的亚基组成的结构是__________
9. 除了膜脂脂肪酰链的长度外,影响膜脂流动性的主要因素是_____________
10. 左旋的Z-DNA与右旋的B-DNA相比,前者的每对核苷酸之间的轴向距离____于后者;前者的直径___于后者
11. 已知二类核糖体失活蛋白(RIP)都是通过破坏核糖体大亚基RNA而使核糖体失活,这二类蛋白质分别具有___________和____________活性
12. 5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）除了参与嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成外,还与___和___氨基酸代谢有关.
13. 大肠杆菌的启动子序列包含有___________,_______________及____________等信息.
14. 逆转录病毒含有单链RNA,感染细胞后转变成双链DNA,这种DNA必须__________,才能发生病毒的复制.
15. 真核RNA聚合酶I主要位于细胞__________中,合成大分子核糖体RNA前体
四.问答题(5X6)
1. 蛋白质化学测序法的原则和程序可归纳为哪5个阶段?(仅需写出阶段名称)
2. 在酶的醇化过程中必须考虑尽量减少酶活性的损失,因此操作过程通常要求在低温下进行.如果醇化一个热稳定(耐温)的酶,是否不需要在低温条件下操作?请简述你的见解.
3. 写出核酸降解的主要步骤（A卷）
4. 简述RNA剪接和蛋白质剪接
5.真核细胞中有几种RNA聚合酶？它们的主要功能是什么？
中科院2001年攻读硕士学位研究生入学试题答案
一、是非题
1、-2、-3、-4、+5、-6、+7、-8、-9、+10、-11、+12、+13、+14、+15、-16、-17、+18、+19、-20、-
二、选择题
1、C；2、A；3、A；4、B；5、C；6、B；7、A；8、B；9、C；10、C；11、B；12、B；13、D；14、B；15、D；16、A；17、A；18、B；19、B；20、B；21、B；22、A；23、D；24、C；25、A
三、填空题
1、前胰岛素原、胰岛素原；2、三条肽链组成的右手螺旋、左手螺旋；3、Kcat、自杀性底物；4、生物体所拥有的全套蛋白质或基因组所编码的全部蛋白质；5、二酰基甘油、Ca2+；6、细菌视紫红质、孔蛋白；7、糖脂类；8、α3β3γеd；9、脂肪酰链的不饱和度；10、大、小；11、RIP、磷酸二酯酶、N-糖苷酶；12、PRPP、组氨酸、色氨酸；13、操纵基因结合、RNA聚合酶结合、转录起始；14、整合人宿主染色体；15、核仁
四、问答题
1、⑴肽链的选择性断裂，用特异性较强的蛋白酶或化学试剂⑵对得到的肽链进行分离⑶分别测定每个肽段的氨基酸序列⑷用另一种方式断裂台联，并重复前三个步骤，测定另一组肽段的氨基酸序列⑸利用两组肽段的序列，进行重叠从而得到肽链的全序列。
2、在低温进行蛋白质（包括酶）的分离纯化，既可以防止蛋白质的变性而失活，又可以避免长菌而污染。但有些寡聚蛋白在低温时，反而会解聚而失活。特别是一些热稳定的酶的疏水作用可能起到相当重要的作用。因此在防止微生物污染的前提下，应该避免使用低温条件。
3、核酸→寡核苷酸→核苷酸→核苷→碱基+戊糖-1-磷酸
⑴      ⑵       ⑶    ⑷
催化⑴的是核酸酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶或磷酸二酯酶；催化⑵同⑴；催化⑶的是核苷酸酶；催化⑷的是核苷磷酸化酶。
4、剪切是指删除由基因中的内含子转录和翻译产生的非编码功能序列，是转录后加工和翻译后加工的非常重要而不可缺少的步骤。已知多数情况下在RNA水平上的删除叫RNA剪切，在蛋白质水平上的删除叫蛋白质剪切。蛋白质剪切是一种翻译后修饰事件，它将插入前体蛋白的中间的蛋白质肽段（Intein，internal protein fragment）剪切出来，并用正常肽键将两侧蛋白质多肽链（Extein，flanking protein fragments）连接起来。在此过程中不需要辅酶或辅助因子的作用，仅需四步分子内反应。Intein 及其侧翼序列可以通过突变产生高度特异性的自我切割用于蛋白质纯化、蛋白质连接和蛋白质环化反应，在蛋白质工程方面有广泛的应用前景。
5、真核生物的RNA聚合酶，按照对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类：RNA聚合酶Ⅰ基本不受α-鹅膏蕈碱的抑制，在大于10-3M/L时才有轻微的抑制。RNA聚合酶Ⅱ对α-鹅膏蕈碱最为敏感，在10-8M/L一下就会被抑制。RNA聚合酶Ⅲ对α-鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅱ之间，在10-5M/L到10-4M/L才会有抑制现象。
RNA聚合酶Ⅰ存在与核仁中，其功能是合成5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA。
RNA聚合酶Ⅱ存在于核质中，其功能是合成mRNA、snRNA。
RNA聚合酶Ⅲ存在于核质中，其功能是合成tRNA和5SrRNA及转录Alu序列。
相关内容：原核生物的DNA聚合酶及功能，真核生物的DNA聚合酶及功能，转录调控，复制的调控。

中科院2003生化与分子
一.是非题（共25分）
1.多肽链的共价主链形式可以是双链或单链（）
2.分子量相同的两种蛋白质，如分子中酪氨酸和色氨酸残基数亦相同，，其摩尔消光系数可能不同（）
3.胰岛素元的降血糖活性是胰岛素的1/10左右（）
4.苯丙氨酸是人体必需氨基酸（）
5.丝-酪-丝-甲硫-谷-组-苯丙-赖-色-甘十肽经胰蛋白酶部分水解后，溶液中将有两种肽段存在（）
6.核酸在pH3.5的缓冲液中电泳时，是从正极向负极运动的（）
7.核糖体上蛋白质生物合成时，催化肽键合成的是核糖体RNA()
8.tRNA转录后加工有剪接反应，它是有蛋白质催化的（）
9.核酸降解成单核苷酸时，紫外吸收值下降（）
10.RNA连接酶的底物是RNA,DNA连接酶的底物是DNA()
11.DNA的复制方法有多种，滚动式复制方式通常以双向方式进行（）
12.色氨酸操纵子（trpoperon）中含有衰减子序列（）
13.对正调控和负调控操纵子而言，诱导物都能促进基因的转录（）
14.RecA蛋白只能与单链DNA结合，并发挥NTP酶活性（）
15.在克隆载体pBSK质粒中，利用完整的lacZ基因作为筛选标记，白色转化菌落表明重组质粒含有插入片断（）
16溶菌酶水解的底物是N-乙酰氨基葡萄糖的聚合物（）
17.激素受体都具有酪氨酸受体结构域（）
18.在底物的浓度达到无限大又没有任何效应剂存在的条件下，酶催化反应为零级反应（）
19.蛋白质可接离的基团都来自其侧链上的基团（）
20.蛋白质的等电点和它所含的酸性氨基酸残基和碱性氨基酸残基的数目比例有关（）
21.心碱脂是一种在中性pH下带正电荷的磷脂（）
22.生物膜上有许多膜固有蛋白，他们的跨膜肽段大多呈α螺旋结构（）
23.生物膜以脂双层结构为骨架，虽然细胞的不同膜由不同的磷脂组成，但脂双层的两个单层的磷脂组成是基本一致的（）
24.NADH氧化时的P/O比值时3（）
25.生物膜是离子与极性分子的通透屏障，但水分子是例外（）
二.选择题（共20分）
1.胰岛素的功能单位是       
A单体；  B二体；  C四体；  D六体
2.1mol/L硫酸钠溶液的离子浓度为   
A 2；     B 3；    C 6；       D 8
3.某蛋白质的pI为8，在pH6的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为
A。像正极方向泳动；B没有泳动；C向负极方向泳动；D向正负极扩散
4.今有A,B,C,D四种蛋白质，其分子体积由大到小的顺序是A>B>C>D,在凝胶过滤柱层析过程中，最先洗脱出来的蛋白质一般应该是    
A A;   B B;   C C;  D D
5.噬菌体展示可用来研究 
A蛋白质-蛋白质相互作用； B蛋白质-核酸相互作用； C核酸-核酸相互作用；  D噬菌体外壳蛋白性质
6.DNA合成仪合成DNA片断时，用的原料是
A 4种dNTP;        B 4种NTP;         C 4种dNDP;      D4种脱氧核苷的衍生物
7.酒精沉淀核酸时，下列何种长度核苷酸不能被沉淀   
A10； B20； C50； D100
8.反密码子IGC可以识别的密码子是    
A。GCG;  B。GCA;  C。ACG;  D。ICG
9.真核RNA聚合酶2最大亚基C末端重复序列的功能是
A磷酸化使RNA聚合酶2与其它转录因子解离，促进转录的起始与延伸；
B乙酰化使RNA聚合酶2与组蛋白竞争结合与DNA上，促进转录的起始与延伸；
C甲基化使RNA聚合酶2活化，促进转录的起始与延伸；
D三者都有
10.GAL4因子能够结合于基因的上游调控序列并激活基因的转录，它的DNA结合结构域属于  
A锌指结构；     B亮氨酸拉链结构；   C螺旋-环-螺旋结构；   D螺旋-转角-螺旋结构
11.RNA聚合酶1的功能是
A转录tRNA和5sRNA基因；       B转录蛋白质基因和部分snRNA基因；
C只转录rRNA基因；              D转录多种基因
12.在真核细胞内，着丝粒是指
A两个构成染色体DNA分子的连接区域；
B一段高度重复的序列与组蛋白结合形成异染色质区；
C染色体DNA上的一段特殊序列，能够促进与纺锤体的相互作用；
D大约430bp长的一段序列，两端为两段高度保守的序列
13.下列哪种酶的巯基参与催化肽键断裂反应  
A羧肽酶Y; B胃蛋白酶；C木瓜蛋白酶；D胰凝乳蛋白酶
14.达到反应平衡时，决定酶催化反应中底物转化为产物比率的参数是
A酶的比活力高低；  B酶的Vmax大小；  C酶的转化数；   D酶的Km
15.自然界通过光合作用生成大量的植物干物质，其中含量最高的是
A淀粉；   B木质素；   C纤维素；   D半纤维素
16.能催化蛋白质的谷氨酸及天冬氨酸的羧基侧肽键断裂反应的酶是
A枯草杆菌蛋白酶；  B胃蛋白酶；  C嗜热菌蛋白酶；  D金黄色葡萄糖球菌v8蛋白酶
17.下列化合物中哪一个是线粒体氧化磷酸化的解偶联剂
A氯霉素；    B抗酶素A;          C2,4-二硝基苯酚；       Dβ-羟基丁酸
18.蛋白激酶A催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化，它是
A酪氨酸残疾；   B组氨酸残基；   C丝氨酸残基；   D门冬氨酸残基
19.钠钾ATP酶催化一分子ATP水解时，同时
A泵出2Na+,泵入2K+;  B泵出3Na+，泵入3K+;  C泵出2Na+,泵入3K+;  D泵出3Na+，泵入2K+;
20.动物细胞质中游离Ca2+的浓度大约是细胞外的 
A 1/1000；    B 1/200；    C 1/50；    D 1/10