以下内容为生化期末考试复习材料，根据95-08历年考试大题关键词涉及相关知识点频率排序。“★”数量仅代表出现次数，与重要性无关。

1.    胆汁酸、肝肠循环相关，胆红素代谢 ★★★★★★★★★
胆汁酸(bile acids)：存在于胆汁中一大类胆烷酸总称，以钠盐或钾盐的形式存在，即胆汁酸盐，简称胆盐。有游离型、结合型及初级（在肝细胞以胆固醇为原料直接合成的胆汁酸，包括胆酸、鹅脱氧胆酸及其与甘氨酸或牛磺酸的结合产物）、次级之分（在肠道受细菌作用，第7位α羟基脱氧生成的胆汁酸称为次级胆汁酸，主要包括脱氧胆酸和石胆酸及其在肝中分别与甘氨酸或牛磺酸的结合产物）。
胆汁酸的生理功能：促进脂类的消化与吸收，维持胆汁中胆固醇的溶解状态以抑制胆固醇析出。
胆汁酸的代谢及胆汁酸的肠肝循环：胆固醇转化成胆汁酸是其在体内代谢的主要去路。初级胆汁酸在肝内以胆固醇为原料生成。限速酶--胆固醇7α-羟化酶；关键酶--HMG-CoA还原酶。次级胆汁酸在肠道由肠菌作用生成。胆汁酸的肠肝循环使有限的胆汁酸库存循环利用：胆汁酸随胆汁排入肠腔后，约95%胆汁酸可经门静脉重吸收入肝，在肝内转变为结合胆汁酸,并与肝新合成的胆汁酸一道再次排入肠道，此循环过程称胆汁酸的肠肝循环；在于可使有限的胆汁酸库循环利用，以满足机体对胆汁酸的生理需求。

胆色素(bile pigment)是体内铁卟啉类化合物的主要分解代谢产物，包括胆绿素、胆红素、胆素原和胆素等。胆红素(bilirubin)处于胆色素代谢的中心，是人体胆汁中的主要色素。胆红素主要源于血红素的降解：胆红素主要源于衰老红细胞的破坏，血红素加氧酶和胆绿素还原酶催化胆红素的生成。胆红素是人体内强有力的内源性抗氧化剂，是血清中抗氧化活性的主要成分。血液中的胆红素主要与清蛋白结合而运输：一方面增加了胆红素的水溶性，提高了血浆对胆红素的运输能力；另一方面限制了它自由通透各种细胞膜，避免了它对组织细胞造成的毒性，起到暂时性的解毒作用。过多的游离胆红素则可与脑部基底核的脂类结合，干扰脑的正常功能，称为胆红素脑病或核黄疸。胆红素在肝细胞中转变为结合胆红素并泌入胆小管：游离胆红素可渗透肝细胞膜而被摄取；胆红素在内质网结合葡糖醛酸生成水溶性结合胆红素（催化酶--葡糖醛酸基转移酶。胆红素与葡糖醛酸的结合是肝对有毒性胆红素一种根本性的生物转化解毒方式）；肝细胞向胆小管分泌结合胆红素（结合胆红素从肝细胞分泌至胆小管，再随胆汁排入肠道，是肝脏代谢胆红素的限速步骤。肝细胞向胆小管分泌结合胆红素是一个逆浓度梯度的主动转运过程。多耐药相关蛋白2是肝细胞向胆小管分泌结合胆红素的转运蛋白）。胆红素在肠道内转化为胆素原和胆素：胆素原（经肝细胞转化生成的葡糖醛酸胆红素随胆汁进入肠道，在回肠下段和结肠的肠菌作用下，脱去葡糖醛酸基，并被还原生成d-尿胆素原和中胆素原；后者又可进一步还原生成粪胆素原，这些物质统称为胆素原）是肠菌作用的产物；少量胆素原可被肠粘膜重吸收，进入胆素原的肠肝循环（肠道中有少量的胆素原可被肠粘膜细胞重吸收，经门静脉入肝，其中大部分再随胆汁排入肠道，形成胆素原的肠肝循环）。高胆红素血症及黄疸：正常人胆红素（0.2-1mg/dl）的生成与排泄维持动态平衡；黄疸（胆红素为橙黄色物质，过量的胆红素可扩散进入组织造成组织黄染。分为显性黄疸、隐性黄疸）依据病因有溶血性（由于红细胞的大量破坏，在单核-吞噬细胞系统产生胆红素过多，超过了肝细胞摄取、转化和排泄胆红素的能力，造成血液中未结合胆红素浓度显著增高所致）、肝细胞性（由于肝细胞功能受损，造成其摄取、转化和排泄胆红素的能力降低所致）和阻塞性（由于各种原因引起的胆管系统阻塞，胆汁排泄障碍所致）之分。



2.    Bohr效应、2,3BPG旁路途径、作用 ★★★★★★
红细胞糖代谢：90%-95% 经糖酵解通路、2,3-二磷酸甘油酸旁路进行代谢，5%～10%通过磷酸戊糖途径进行代谢。2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)旁路：2,3-BPG对二磷酸甘油酸变位酶的负反馈作用大于对3-磷酸甘油酸激酶的抑制作用，所以2,3-二磷酸甘油酸支路仅占糖酵解的15%-50%，但是由于2,3-BPG磷酸酶的活性较低，2,3-BPG的生成大于分解，造成红细胞内2,3-BPG升高。在血液流到需供氧组织后 2,3-BPG的电负性的存在使血红蛋白结合氧气能力下降，利于放出氧。

3.    DNApol分类，真核原核复制过程比较 ★★★★★
分类略
起始：解链，生成引物，形成引发体
      原核：一个复制点，双向复制，
 真核：多个复制起始点，复制子，（酵母的ARS）
复制叉形成→引物酶进入→形成引发体（解螺旋酶、Dna C蛋白、引物酶和DNA复制起始区域；ATP供能）真核起始需要DNA polα和δ，拓朴酶和RFA、RFC；PCNA——参与复制起始和延长。在RFC作用下结合于引物-模板链，使polδ获得持续合成的能力
延长：原核：连续、不连续；冈崎片段1000～2000nt
      真核：引物和冈崎片段比原核的短
终止：去除引物，填补两片段间的空隙，连接缺口
真核生物复制终止和端粒酶；爬行模型

（RNA pol）：
原核生物RNA pol                                真核生物RNA pol
四种亚基α2ββ´σ组成五聚体的蛋白质      三种RNA-pol：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ
α：决定转录哪些类型和种类的基因         Ⅰ：转录产物为45S-rRNA，
β：与转录全过程有关（催化）             Ⅱ：转录产物为hnRNA，然后加工成mRNA
β´：结合DNA模板（开链                  Ⅲ：转录产物为5S-rRNA tRNA、snRNA                            
σ：辨认转录起始点，已发现多种，如σ70、σ32等    

真核生物也普遍存在热休克基因

4.    G蛋白、其偶联受体及其效应相关 ★★★★★
鸟苷酸结合蛋白：G蛋白，亦称 GTP 结合蛋白，是一类信号转导分子，在各种细胞信号转导途径中转导信号给不同的效应蛋白。G蛋白结合的核苷酸为GTP时为活化形式，作用于下游分子使相应信号途径开放；当结合的GTP水解为GDP时则回到非活化状态 ，使信号途径关闭。包括异源三聚体G蛋白、低分子量G蛋白。
介导七跨膜受体信号转导的异源三聚体G蛋白：α亚基，具有多个功能位点与GTP酶活性；β、γ亚基，主要作用是与α亚基形成复合体并定位于质膜内侧；在哺乳细胞，βγ亚基也可直接调节某些效应蛋白。G蛋白通过G蛋白偶联受体（GPCRs）与各种下游效应分子联系，调节各种细胞功能。重要的信号转导分子--低分子质量G蛋白：Ras是第一个被发现的小G蛋白 ，因此这类蛋白质被称为Ras家族，因为它们均由一个GTP酶结构域构成，故又称Ras样GTP酶
G蛋白偶联受体（受体信号转导的第一步反应都是活化G蛋白）通过G蛋白-第二信使-靶分子发挥作用。G蛋白的活化启动信号转导：信号转导途径的基本模式-- G蛋白循环。
胰高血糖素通过AC-cAMP-PKA通路转导信号；血管紧张素II通过PLC-IP3/DAG-PKC通路介导信号转导

5.    Klienow片段相关 ★★★★
Klenow片段（克列诺片段，Klenow fragment，或称克列诺酶，Klenow enzyme）：E.coli DNA聚合酶I经胰蛋白酶或枯草杆菌蛋白酶部分水解生成的C末端605个氨基酸残基片段。该片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性，但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性。

6.    PCR技术原理与衍生技术 ★★★★
聚合酶链反应基本工作原理：似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。模板DNA的变性--模板DNA经加热至95℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；引物的延伸--DNA模板（引物结合物）在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。重复循环变性、退火、延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板
逆转录PCR(RT-PCR)：将RNA的逆转录反应和PCR反应联合应用的一种技术。是目前从组织或细胞中获得目的基因以及对已知序列的 RNA 进行定性及半定量分析的最有效方法。
原位PCR(in situ PCR)：在组织切片或细胞涂片上的单个细胞内进行的 PCR 反应，然后用特异性探针进行原位杂交，即可检出待测DNA 或RNA是否在该组织或细胞中存在。原位PCR方法弥补了PCR技术和原位杂交技术的不足，是将目的基因的扩增与定位相结合的一种最佳方法。
实时PCR(real-time PCR)技术：通过动态监测反应过程中的产物量，消除了产物堆积对定量分析的干扰，亦被称为定量PCR

7.    乳糖操纵子相关 ★★★★
操纵子调控模式在原核基因转录起始的调节中具有普遍性。
乳糖操纵子(lac operon)的结构：调控区（CAP结合位点、P--启动序列、O--操纵序列），结构基因（Z--β-半乳糖苷酶、Y--透酶、A--乙酰基转移酶），受阻遏蛋白的负性调节，CAP的正性调节，当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用。如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源；若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时，细菌首先利用葡萄糖。葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏。
细菌优先利用葡萄糖，因为：细胞内存在大量利用葡萄糖的酶；葡萄糖为单糖；葡萄糖的利用会降低cAMP的浓度，降低cAMP依赖性的CAP的活性。

8.    HGP、HPP ★★★★
HGP：1990年由美国能源部(DOE)和国立健康研究院(NIH)资助的一个研究计划。目的是：① 鉴定出人类的所有基因；② 确定构成人类基因组的约30亿个碱基对的序列；③ 将上述信息储存于专门的数据库中，并开发出相应的分析工具；④ 研究由此而产生的伦理、法律和社会问题并提出相应对策
HPP：2003年4月，历时13年的“国际人类基因组计划”正式完成。但仅仅测绘出基因组序列，并非这一计划的最终目的，必须对其编码产物———蛋白质组进行系统深入的研究，才能真正实现基因诊断和基因治疗。人类蛋白质组研究成为继人类基因组计划之后生物科技发展的重要课题

9.    原核真核蛋白质合成步骤比较 ★★★
     真核     原核
核蛋白体     80S    70S
含蛋白数量     多于80     少于60
小亚基结构     无嘧啶区和互补区     含嘧啶区与互补
起始tRNA     tRNAimet     tRNAfmet
启动     eIF  9~10种,需ATP,小亚基先与tRNA结合，再与mRNA结合    IF1、IF2、IF3，仅需GTP，小亚基先与mRNA结合
延长     EF1，EF2     EFTu  EFTs
终止    RF  需 GTP     RF1、RF 2、RF3   

10.    冈崎片段 ★★★
DNA复制过程中，2条新生链都只能从5端向3端延伸，前导链连续合成,滞后链分段合成，这些分段合成的新生DNA片段称冈崎片段，细菌冈崎片段长度1000-2000核苷酸，真核生物冈崎片段长度100-200核苷酸.

11.    （病毒）癌基因 ★★★
癌基因 (oncogene)：细胞内控制细胞生长和分化的基因，它的结构异常或表达异常，可以引起细胞癌变
原癌基因(pro-onc)：存在于生物正常细胞基因组中的癌基因。也称细胞癌基因(c-onc)
病毒癌基因（V-onc）：存在于病毒基因组中的癌基因，它不编码病毒的结构成分，对病毒复制也没有作用，但可以使细胞持续增殖。
细胞癌基因：是维持细胞正常功能的重要成分。在控制细胞生长分化中起重要作用，只有当它的结构或调节区域发生变化，使其被激活，影响了正常生物功能时，才使得细胞发生转化，发生癌变
12.    转录与复制的比较 ★★★
                    复   制                            转   录

相同点   ①都是酶促的核苷酸聚合过程        ④核苷酸之间都以磷酸二酯键相连
         ②都是以DNA为模板                ⑤服从碱基配对规则
         ③合成方向都是5´→ 3´             ⑥都需要依赖DNA的聚合酶
 不同点
①模板    两股DNA链都复制                  模板链转录（不对称转录）
②原料   dNTP（=dATP、dGTP、dCTP、dTTP）     NTP（ATP、GTP、CTP、UTP）
③配对    A=T，G≡C                              A=U，G≡C，T=A
④酶         DNA-pol                                  RNA-pol
⑤引物    需要RNA引物                               不需要引物
⑥产物   子代双链DNA（半保留复制）               mRNA，tRNA，rRNA     

13.    重组体的筛选★★★
筛选（选择）：将培养基中众多的转化 菌落（菌斑）分开，并鉴定出带有目的基因的菌落的过程。 
              方法：       直接法    抗药性标志选择
                                     标志补救：营养缺陷互补，α-互补
                                     分子杂交法
                           非直接法  免疫化学法
                                     酶联免疫检测法

14.    胰高血糖素作用通路 ★★★
 

15.    基因治疗相关 ★★
基因治疗：将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用 ,以治疗疾病的方法，称为基因治疗。基因治疗的基本策略：缺陷基因精确的原位修复基因增补。基因治疗的基本程序：治疗性基因的选择，基因载体的选择，靶细胞的选择，基因转移。

16.    生物转化意义 ★★
机体对内、外源性的非营养物质进行代谢转变，使其水溶性提高，极性增强，易于通过胆汁或尿液排出体外的过程称为生物转化。生物转化可对体内的大部分非营养物质进行代谢转化，使其生物学活性降低或丧失(灭活)，或使有毒物质的毒性减低或消除(解毒)。通过生物转化作用可增加这些非营养物质的水溶性和极性，从而易于从胆汁或尿液中排出。特点：连续性、多样性、解毒与致毒的双重性

17.    小RNA们 ★★
小分子RNA对基因表达的调节十分复杂：很多非编码RNA参与真核基因表达调控，核酶、snRNA、miRNA及小干扰RNA等，构成RNA组学的概念。
微小RNA (microRNA, miRNA)：是一大家族小分子非编码单链RNA，长度约20~25个碱基，由一段具有发夹环结构，长度为70~90个碱基的单链RNA 前体(pre-miRNA)经Dicer酶剪切后形成。成熟的miRNA与其他蛋白质一起组成RNA诱导的沉默复合体（RISC）,通过与其靶mRNA分子的3`端非编码区互补配对，抑制该mRNA的翻译；抑制翻译的机制尚不清楚。
小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)：是细胞内一类双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)在特定情况下通过一定酶切机制，转变为具有特定长度(21~23个碱基)和特定序列的小片段RNA。双链siRNA参与RISC组成，与特异的靶mRNA完全互补结合，导致靶mRNA降解，阻断翻译过程。由siRNA介导的基因表达抑制作用被称为RNA干涉(RNAi)。
相同点：均有Dicer酶产生，长度都在22碱基左右，都与RISC形成复合体，都与mRNA作用引起基因沉默。
不同点：前体、结构、功能、靶mRNA 结合、生物学效应

18.    特殊DNA序列 ★★
略（TATA等）

19.    不对称转录 ★
不对称转录：在DNA分子双链上，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录；模板链并非总是在同一单链上。编码链：相对于模板链的另一股单链，mRNA的碱基序列除用U代替T外，与编码链是一致的

20.    凝血原 ★
略

21.    分子伴侣 ★
分子伴侣：分子伴侣是细胞内一类可识别肽链的非天然构象、促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠的保守蛋白质。功能为①封闭待折叠蛋白质的暴露的疏水区段②创建一个隔离的环境，可以使蛋白质的折叠互不干扰③促进蛋白质折叠和去聚集④遇到应激刺激，使已折叠的蛋白质去折叠。分为核糖体结合性（触发因子、新生链相关复合物）和非核糖体结合性。

22.    断裂基因 ★
断裂基因：真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。

23.    P53 ★
P53基因是以它的蛋白质产物53Kd命名的。定位于17q13， 由11个外显子组成。是细胞生长中重要的负调节基因，在正常细胞中维持细胞正常分化和增殖，阻抑癌变。编码蛋白质为P53， 是一种核内磷酸化蛋白。P53基因是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性最高的基因。过去一直把它当成一种癌基因，直至1989年 才知道起癌基因作用的是突变p53，后来证实野生型p53是 一种抑癌基因。
按照氨基酸序列将P53蛋白分为三个区：核心区（位于P53蛋白分子中心，由1 02－290位氨基酸残基组成，在进化上高度保守，在功能上十分重要，包含有结合DNA的特异性氨基酸序列），酸性区（由N端 1－ 80位 氨基酸残基组成，易被蛋白酶水解，半寿期短与此有关。含有一些特殊的磷酸化位点），碱性区（位于 C端 ，由 319－ 393位 氨基酸残基组成。p53蛋白通过这一片段可形成四聚体。C端 可以单独具备转化活性，起癌基因作用，且有多个磷酸化位点，为多种蛋白激酶识别）。
P53基因时刻监控着基因的完整性，一旦细胞DNA遭到损害，P53蛋白与基因的 DNA相应部位结合，起特殊转录因子作用，活化 P21基因转 录，使细胞停滞于G1期；抑制解链酶活性；并与复制因子A相互作用参与DNA的 复制与修复；如果修复失败，p53蛋白即启动程序性死亡过程诱导细胞自杀，阻止有癌变倾向突变细胞的生成，从而防止细胞恶变。当P53发生突变后，由于空间构象改变影响到转录活化功能及P53蛋白的磷酸化过程，这不单失去野生型P53抑制肿瘤增殖的作用，而且突变本身又使该基因具备癌基因功能。突变的P53蛋白与野生型P53蛋白相结合，形成的这种寡聚蛋白不能结合DNA， 使得一些癌变基因转录失控导致肿瘤发生。

24.    SD序列 ★
SD序列（Shine-Dalgarnosequence）：mRNA中用于结合原核生物核糖体的序列。SD序列在细菌mRNA起始密码子AUG上游10个碱基左右处，有一段富含嘌呤的碱基序列，能与细菌16SrRNA3’端识别，帮助从起始AUG处开始翻译。(AGGAGG)
25.    复制的特点 ★
半保留复制：复制时，母链的双链DNA解开成两条单链，各自作为模板指导合成新的互补链。子代DNA双链中一股从亲代完整地接受过来，另一条完全重新合成。
双向复制：DNA从起点向两个方向解链形成两个延伸方向相反的复制叉
半不连续复制：领头链——子链合成的方向与解链方向一致
后随链——链合成的方向与解链方向相反（冈崎片段）
复制的高保真性：遵守严格的碱基配对规律（模板依赖性，氢键准确搭配）；聚合酶的复制延长中对碱基的选择功能（对碱基构型的亲和力）（DNA polⅢ，DNA polα、δ、ε）
复制出错时有即时的校读功能（DNA polⅠ，DNA polε）

26.    顺式作用元件★
 

中大历届试题+答案生化--遗传篇

简答30分
复制和转录的异同点
相同点：酶促核苷酸聚合过程；DNA为模板；依赖DNA的酶；5'→3'方向聚合；磷酸二酯键；碱基互配
不同        复制        转录
        整个基因组        基因组中一部分基因
模板        两股链        单链
原料        4种dNTP        4种NTP
配对        A＝T、C≡G        A＝T、C≡G、A＝U