微生物学复习题考研资料(6)
本站小编 免费考研网/2016-05-13
微生物生长情况可以通过测定单位时间里微生物数量或生物量的变化来评价。通过微生物生长的测定可以客观地评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响,或评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果,或客观反应微生物的生长规律
分批培养:是指微生物在封闭系统中进行的培养培养过程中不对培养基进行更换。
细菌生长规律及应用:
答:封闭系统中微生物大生长经历迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期4个生长时期
1) 迟缓期 细胞体积增大,细胞内RNA、蛋白质含量增高,合成代谢活跃,细菌对外界不良条件反应敏感。细胞 处于活跃生长中国,但分裂迟缓。在此阶段后期,少数细胞开始分裂,曲线略有上升。
2) 对数期 细菌以最快的速度生长和分裂,导致细菌数量呈对数增加,细胞内所有成分以彼此相对稳定的的速度合成,细菌为平衡生长。由于营养物质消耗,代谢产物积累和环境变化等。
3) 稳定期 群体的生长逐渐停止,生长速率降低至零,活细菌数量最高并且保持稳定,细菌开始储存糖原等内含物,该期是发酵过程积累代谢产物的重要阶段。营养物质消耗和有害物的积累引起环境恶化,导致细胞奥数量下降,进入衰亡期。
4) 衰亡期 细菌代谢活性低,细菌衰老并出现自溶,产生或释放出一些产物,菌体细胞呈现多种形态,细胞大小悬殊。
应用:在工业发酵和科学研究中迟缓期会增加生产周期而产生不利影响,因此,需要采取必要措施来缩短迟缓期。对数期的培养物由于生活力强,因而在生产上普遍用作“种子”,对数期的培养物业常常用来进行生物化学和生理学研究。稳定期是积累代谢产物的重要阶段,如果及时采取措施,补充营养物质或去除代谢物或改善培养条件,可以延长稳定期以获得更多的菌体或代谢产物。
连续培养的优缺点:
连续培养:是指通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率并能持续生长下去的培养方法。一般是通过在微生物培养过程中不断地补充营养和以同样的速率移出培养物来实现微生物的连续培养。
优点:能缩短发酵周期,提高设备利用率,便于自动控制,降低动力消耗及体力劳动强度,产品质量较稳定。
缺点:长时间培养易导致杂菌污染和菌种退化能问题。
发酵过程中一边补入新鲜料液一边放出等量的发酵液,使发酵罐内的体积维持
恒定。达到稳态后,整个过程中菌的浓度,产物浓度,限制性基质浓度都是恒定的。
连续培养的优缺点
优点 控制稀释速率可以使发酵过程最优化。发酵周期长,得到高的产量。由于 μ= D,通过改变稀释速率可以比较容易的研究菌生长的动力学
缺点 菌种不稳定的话,长期连续培养会引起菌种退化,降低产量。长时间补料染菌机会大大增加。
什么是抗性菌株?有什么特点?如何避免菌株抗药性的产生?
抗性菌株:抗生素与一些其他抗代谢物,如磺胺类药物等通常是临床上广泛使用的化学治疗剂,在多次重复使用后,使一些微生物变得对它们不敏感,作用效果越来越差,这种对某些抗生素不敏感的微生物菌株称为抗性菌株。
特点(书):①细胞质膜透性改变
②药物作用靶改变
③合成了修饰抗生素的酶
④抗性菌株发生遗传变异
(越姐)
1) 缺乏某类药物作用的结构 如支原体无细胞壁对青霉素不敏感
2) 化学治疗剂不能穿过细胞膜进入胞内 如委内瑞拉链霉菌可通过改变细胞膜透性二阻止四环素进入细胞
3) 化学治疗剂呗变为无活性的形式 如某些金黄色普葡萄球菌耐药菌株产生内酰胺酶,使青霉素分子中的内酰胺环开裂二失去抑菌作用
4) 药物的作用部位被修饰改变
5) 被药物阻断的代谢途径发生遗传改变
6) 将进入到胞内的药物泵出胞外
如何避免:①第一次使用的药剂量要足
②避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素
③不同的抗生素(或与其它药物)混合使用
④对现有抗生素进行改造
⑤筛选新的更有效的抗生素,这样既可以提高治疗效果,又不会使细菌产生抗药性。
第七章 病毒
噬菌斑:经适当稀释度噬菌体标本接种于细菌平板,经过一定时间培养后在细菌菌苔上形成的圆形局部透明溶菌区域。
溶源性细菌:细胞中含有以源噬菌体状态存在的温和噬菌体基因组的细菌
原噬菌体:整合于细菌染色体或以质粒形式存在的温和噬菌体基因组
在发酵工业中为什么常污染噬菌体:
1.发酵种子污染:种子本身带有杂菌或种子培养过程中染菌。
2.灭菌不彻底:培养基、发酵罐、补料系统、消泡剂贮罐及接种管道灭菌不彻底等原因都有可能导致染菌。
3.空气带菌:空气管道灭菌不彻底等。
4.设备渗漏等原因引起染菌
5. 操作不当,管理不善等原因引起染菌,如接种、补料、取样等操作是否严密规范。
如何监测、预防和治理噬菌体:
检测:A.离心分离加热法(快速检查)
取生产中正常培养液和怀疑侵染有噬菌体的异常菌培养液,4000rpm离心20min,分别取两组发酵液的上清液(A1),一部分于分光光度计上测定OD650光密度值,另外各取5mL上清液于试管中,置水浴中煮沸2min(A2),检测A2溶液OD650光密度值,记录结果,比较光密度的差异。
B载玻片法快速检测
将怀疑噬菌体污染的菌悬液与0.5-0.8%琼脂培养基混合,在无菌载玻片上凝固,经过培养2.5-4个小时,在显微镜下计数噬菌斑。
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