中国科学院分子生物学习题整理(3)
本站小编 福瑞考研网/2016-12-10
10.举例说明基因定位克隆的使用。
从染色体上已知位置出发,克隆或鉴定遗传疾病相关的未知功能基因的技术。
定位克隆首先是获取基因在染色体上的位置的信息,然后采用各种实验方法克隆基因和进行定位。基因的定位克隆策略大体上可以分成四个步骤。
①通过家系连锁分析资料或染色体微小缺失(杂合性丢失,LOH)等数据,确定基因在染色体上的位置;
②通过染色体步移(chromosomewalking)、染色体区带显微切割等技术,获得基因所在区段的DNA片段叠连群(contig),绘制出更精细的染色体图谱;
③确定含有候选基因的染色体片段;
④从这些片段中进一步筛选目的基因,并作突变检测验证和功能分析。
基因定位克隆或图位克隆(map-based cloning)是用于分离其编码产物尚不知道的目的基因的一种有效的方法。具体的步骤是:先将目的基因,亦即目的基因的突变定位到染色体上,并在目的基因的两侧确定一对紧密连锁的RFLP或RAPD分子标记;接着利用最紧密连锁的一对两侧分子标记作探针,通过染色体步移技术将位于这两个分子标记之间的含目的基因的特定的片段克隆并分离出来;最后是根据其同突变体发生遗传互补的能力从此克隆中鉴定出目的基因。成功地应用基因定位技术分离目的基因的一个必要条件是,以酵母人工染色体YAC(yeast artificial chromosome)为载体构建含有大片段DNA的YAC库。另一个必要的条件是要有可用的同目的的基因紧密连锁的DNA探针。
11.Genomics:基因组学,研究生物基因组和如何利用基因的一门学问。用于概括涉及基因作图、测序和整个基因组功能分析的遗传学分支。该学科提供基因组信息以及相关数据系统利用,试图解决生物,医学,和工业领域的重大问题。
12. transcriptomics:转录组学,是一门在整体水平上研究细胞中基因转录的情况及转录调控规律的学科。简而言之,转录组学是从RNA水平研究基因表达的情况。
转录组即一个活细胞所能转录出来的所有mRNA。研究转录组的一个重要方法就是利用DNA芯片技术检测有机体基因组中基因的表达。从基因组DNA转录的基因总和,即转录组,也称味表达谱,是研究细胞表型和功能的一个重要手段。而研究生物细胞中转录组的发生和变化规律的科学就称为转录组学(transcriptomics)。
13. Proteomics:蛋白质组学,阐明生物体各种生物基因组在细胞中表达的全部蛋白质的表达模式及功能模式的学科。包括鉴定蛋白质的表达、存在方式(修饰形式)、结构、功能和相互作用等。
14 论述等位基因的生物学意义
等位基因(英语:allele),又称对偶基因,是一些占据染色体的基因座的可以复制的脱氧核糖核酸。大部分时候是脱氧核糖核酸列,有的时候也被用来形容非基因序列。位于同源染色体的同一位置上的基因,是由基因突变而起源的。
15.进行基因克隆如何选择载体?常用载体有哪几种?各自的特点是什么?
. 选择克隆载体的几个重要参数
1)实验对象
2)实验性质
3)载体容量
4)合适克隆位点
5)载体的稳定性
6)载体DNA制备的难易
7)外源基因表达产物产量、产物特点等
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