柠檬酸循环的步骤:①草酰乙酸与乙酰-CoA缩合形成柠檬酸，由柠檬酸合酶催化。②柠檬酸异构化形成异柠檬酸，由乌头酸酶催化。③异柠檬酸氧化形成α-酮戊二酸，由异柠檬酸脱氢酶催化，产生一分子NADN和二氧化碳。④α-酮戊二酸氧化脱羧形成琥珀酸-CoA，由α-酮戊二酸脱氢酶催化，同时产生1分子NADH和CO2。⑤琥珀酸-CoA转化成琥珀酸并产生一个高能磷酸键GTP，由琥珀酰-CoA合成酶催化。⑥琥珀酸脱氢生成延胡索酸，由琥珀酸脱氢酶催化，同时产生1分子FADH2。⑦延胡索酸水合形成L-苹果酸，延胡索酸酶。⑧L-苹果酸脱氢形成草酰乙酸，由苹果酸脱氢酶催化，产生一分子NADH。
5.高等植物和蓝细菌中以非循环光合磷酸化裂解水提供细胞合成还原力。由光合系统Ⅰ和光合系统Ⅱ串联方式作用。光合系统Ⅰ中叶绿素分子P700吸收光子后被激活，释放出一个高能电子传递给铁氧还原蛋白(Fd)，使其被还原。还原的铁氧还蛋白在Fd:NADP+还原酶的作用下，将NADP+还原为NADPH。用以还原P700的电子来源于光合系统Ⅱ。在光合系统Ⅱ中，叶绿素分子P680吸收光子后，释放出一个高能电子，高能电子先传递给辅酶Q，再传给光合系统Ⅰ使P700还原。失去电子的P680靠水的光解产生的电子补充。高能电子从辅酶Q到光合系统Ⅰ的过程可推动ATP的合成。总反应方程如下:
          2NADP+＋2ADP＋2Pi＋2H2O → 2NADPH＋2H+＋2ATP＋O2
光合细菌中只含有一个光合作用中心，以循环光合磷酸化生成ATP，它由循环电子流引起，无NADPH产生，也无O2释放，因为它不涉及PSⅡ。
6.双向电泳是等电点聚焦电泳和SDS-PAGE的组合，即先进行等电点聚焦电泳(按照pI分离)，然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小)，经染色得到的电泳图是一个二维分布的蛋白质图。SDS-PAGE基本操作步骤①SDS-聚丙烯酰胺凝胶制备②加样③电泳④染色⑤观察。
7.CO2的固定途径有卡尔文循环和还原性三羧酸循环。其中主要为卡尔文循环，参与其反应的最重要关键酶是核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶(ribulose-1,5-biphosphate简写为Rubisco/RuBP)，它是二氧化碳固定的受体，活性中心有Mg+，并可被光激活，此外果糖-1,6-二磷酸酶可以是Calvin循环中的限速步骤。叶绿体中CO2固定的调节:①叶绿体基质的pH改变②还原力的产生③Mg+从类囊体腔外流。当有可用的光能用以产生CO2固定所需的ATP和NADPH时循环就运行。糖酵解、三羧酸循环、氧化磷酸化、磷酸戊糖途径以及己糖磷酸途径可以和Calvin循环联系。大致步骤可分为3个阶段:①CO2的固定。在Rubisco羧化酶活性作用下CO2和它的受体结合生成不稳定的中间物，然后裂解成2分子3-磷酸甘油酸。②3-磷酸甘油酸还原。它被还原成丙糖磷酸，甘油醛-3-磷酸。③RuBP在生。RuBP(核酮糖-1，5-二磷酸)是循环的起始物，CO2的受体，必须不断再生才能维持循环的继续。
8.化学渗透假说认为电子传递的自由能驱动氢离子从线粒体基质跨过内膜进入到膜间隙，从而形成跨线粒体内膜的氢离子电化学梯度，这个梯度的电化学电势(electrochemical potential)驱动ATP合成。1,3-二硝基苯酚是氧化磷酸化的解偶联剂，在中性环境下以解离的形式存在不能透过膜，而在酸性环境下接受质子同时将一个质子带入膜内导致内膜对H+的通透性增加，破坏了跨膜质子梯度，使电子传递与ATP形成两个过程分离。
9. 构建表达载体的基本步骤 ①引物设计②目的基因(CDS区）的克隆③目的基因进行酶切④质粒进行酶切线性化，电泳，胶回收纯化⑤模板与线性化质粒连接⑥转化到大肠杆菌DH5α(感受态菌)。⑦鉴定(PCR,测序,酶切)⑧将表达载体导入表达菌株。
基因工程操作步骤:①通过人工切割并分离或人工合成以获得目的基因。②改造作为载体的DNA，如质粒DNA。③把外来的DNA片段与载体DNA在体外重组。④重组的DNA分子引入受体细胞。⑤目的克隆的筛选与鉴定，从大量细胞中筛选增殖的受体细胞，使外来基因在受体细胞正确表达。
cDNA文库构建基本步骤:①制备mRNA，②合成cDNA，③制备载体DNA，④双链cDNA的分子克隆，⑤对构建的cDNA文库进行鉴定，测定文库包含的克隆数，抽查克隆质量和异质性，如果需要可适当扩增。
克隆载体的宿主细胞要求:①易于接受外源DNA，为感受态。②宿主细胞没有限制酶。③宿主细胞没有重组能力。④应易于生长和筛选，克隆载体的选择标志必须与之匹配。⑤符合安全标准。
10.异养生物电子传递链:
                          黄素蛋白中的FADH2
          琥珀酸-Q还原酶(复合体Ⅱ)↓
NADH→NADH-Q还原酶(复合体Ⅰ)→辅酶Q→细胞色素还原酶(复合体Ⅲ(Cytb→Cytc1))→细胞色素c→细胞色素氧化酶(复合体Ⅳ(Cytaa3))→O2  。
植物或蓝细菌光合磷酸化电子传递链:
            光                       H+从基质释放到腔内              光
            ↓                                ↑                     ↓
H2O→锰串→P680→P680*,Pheo,PQA,PQB→PQ→细胞色素复合体b6f → PC → P700 → P700*，A0，A1，Fe-SX，Fe-SA，Fe-SB → Fd → Fp(FAD)    (详见真题或下册212页)
11.紫外分光光度计测蛋白质是否被核酸污染以及核酸是否被蛋白质污染:280 nm和260 nm的吸收差法。核酸对紫外光有很强的吸收，在280 nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克)，但核酸在260 nm处的吸收更强，其吸收高峰在260 nm附近。核酸260 nm处的消光系数是280 nm处的2倍；而蛋白质则相反，其280 nm的紫外吸收值大于260 nm的吸收值。通常： 纯蛋白质的光吸收比值：A280/A260 ＝1.8 如果比值小则说明受到核酸污染。纯核酸的光吸收比值：A280/A260＝ 0.5。纯DNA的A260/A280比值为1.8，纯RNA为2.0，如果比值低，表示受到蛋白(芳香族)或酚类物质的污染，需要纯化样品。