口腔生物学复习资料整理

第一章 口腔微生物学

（名解）

生态系：生物之间、生物与其环境之间的相互关系。

生态学：研究生物与其环境的相互依赖和相互制约的科学。

微生态学：细胞水平或分子水平的生态学。

生态连续：生物体栖息在一个变化的环境中的过程。

小生境（niches）：生物生活、居住的微小范围的环境。小生境的种类、数目是决定在生境中生活的物种数的主要因子。生境或群落的结构愈复杂，其含有的生物种类愈多

极期群落（climax community）：生物体（或细菌）栖息在一个变化的环境中的过程称生态延续，在一个小生境中延续演化组成多种多样复杂的生物群（菌群），环境条件趋于稳定，菌属数和组成的无明显改变，这种群体称极期群落。

口腔生态系：口腔正常菌丛之间以及它们与宿主之间的相互作用，许多正常菌丛和其宿主之间呈动力的平衡状，这种平衡状态对于保持宿主的健康是重要的。

嗜温微生物：为在25-37℃中适宜生长的微生物。

绝对厌氧菌：在无氧环境中发酵生长，氧可抑制或杀灭的细菌。

兼性厌氧菌：在合适的碳或其他能源存在时可在有氧或无氧中生长的细菌。

微嗜氧菌：这类细菌的生长需氧，但所需氧的浓度比正常低，对需氧菌生长合适的浓度，对这类细菌抑制。

牙菌斑（老概念）：堆积在牙表面或其他硬的口腔结构上，不能被中度水喷冲去的细菌团块。

牙菌斑（新概念）：在牙和修复体上软而未矿化的细菌沉积物， 非白垢，它是能够容纳多种多样菌丛生存的生物膜。

生物膜（biofilm）：牙面清洁后，唾液的一些成分会很快地吸附于其上而形成一层均匀无细胞的薄膜，厚度约1～10um，龈缘区较厚而牙尖区较薄，成分大致与唾液相似，对细菌有选择性吸附能力。

点隙裂沟菌斑：存在于牙硬组织沟窝点隙内的菌斑。

附着性龈下菌斑：附着于牙根面或牙结石表面，可能系龈上菌斑在龈沟或牙周袋内的延续。

非附着性龈下菌斑：不附着于牙面或牙根面，却与结合上皮和龈沟上皮直接接触的菌斑。

固有菌丛（indigenous flora）：包含常以高数量（大于1%）存在于某个特殊部位上的菌属，如在龈上菌斑或舌表面。

增补菌丛（supplemental flora）：包含常居的，但是以低数量（小于1%）存在的菌属，当环境改变时可以成为固有菌。

暂时菌丛（transient flora）：是指口腔中的过路细菌。

（填空）

口腔四个主要生态系：颊上皮生态系、舌背部生态系、龈上牙菌斑生态系、龈下牙菌斑生态系

口腔生态系影响因素：物理化学因素、宿主因素、细菌因素、宿主可控制因素

口腔菌丛的主要成员：微需氧菌、兼性厌氧菌、厌氧菌

菌斑成熟的标志是栅栏状结构，约出现在菌斑形成的第5-6天，并可看到谷穗样结构。

口腔链球菌属包括特有的三种：变形链球菌群、唾液链球菌群、血链球菌

（简答）

【生物膜发育5个阶段】

①形成条件薄膜，存有某些微生物的特异性受体，可选择性地接纳某些微生物。

②细菌分子对宿主表面的吸附；

③同种细菌间的聚集和异种细菌间的共聚集；

④各菌属、种的繁殖；

⑤细菌从生物膜脱附着，传播或定植到其他部位。

【成熟菌斑三层结构】

①基底层：均质，无结构。

②细菌层：位于中间地带，含杆菌、球菌、丝状菌，呈栅栏状。

③表层：G -、G+球菌、短杆菌、上皮、 食物残渣、衰亡细胞

【口腔正常菌丛的来源和成立】

①刚出生：来源于母亲，如大肠杆菌和链球菌

②随着对婴儿的喂养和看护：来源于母亲和近亲

③小于1岁：口腔菌丛可有葡萄球菌、链球菌、奈瑟菌等

④学龄前：组成基本与成人相近似，少有产黑色素拟杆菌

⑤13-16岁：产黑色素拟杆菌增多

⑥成年期：主要为血链球菌、链球菌

⑦老年期：血链菌、变链菌逐渐减少

【龈沟液采集】

①沟内法：采集前刮除龈上菌斑、软垢、牙石，漱口，隔湿。先将滤纸前端轻插于龈沟入口处，当感到阻力时再向龈沟深部插入，约5秒钟后取出，放入含预还原传送培养基的带盖小瓶中，加盖灭菌液状石蜡后送检。缺点为：易使龈沟内壁擦伤、出血，而使龈沟液与血液混合。

②沟外法：此法适用于牙周袋较浅时，采集前同沟内法刮治龈上菌斑等诸项处理，然后以短的滤纸片紧贴于牙面、龈缘和附着龈上，使龈沟液慢慢渗至滤纸上。优点为：避免对龈沟内壁物理性刺激，减少出血。

第二章 口腔生物化学

（名解）

胶原酶（collagenase）：存在正常牙龈和龈沟液中，随炎症程度加剧增加，其活性随牙龈炎症、牙周袋深度和骨丧失程度增加而增加。

组织蛋白酶（cathepsin）：是一组细胞内半胱氨酸蛋白酶，当释放入细胞外间隙能分解包括胶原在内的细胞外间质成分。

碱性磷酸酶（alkaline phosphatase）：其活性与骨代谢和嗜中性白细胞脱颗粒密切相关。

生物矿化（biomineralization）：是指生物体内的钙磷等无机离子在多种生物因子的调控下通过化学反应产生难溶性盐与有机基质结合，形成机体矿化组织。

生理性矿化：机体生长发育成熟过程中，无机离子在生物调控下在机体的特定部位与有机基质中的生物大分子结合形成具有一定结构的矿化组织。

病理性矿化：由于机体对生物矿化调控作用失衡，无机离子在不该矿化的部位形成异位矿化或异常矿化组织，或造成矿化组织矿化过度或不足。

（填空）

釉质中蛋白水解酶主要有基质金属蛋白酶20（MMP20）和丝蛋白酶。

釉质晶体的化学性质：吸收性、离子交换。

牙周病变过程中，内毒素、胶原酶、巯基复合物参与了胶原的破坏。

胶原纤维的主要结构是一种多肽链，构成其蛋白分子的肽链有两类：α1和α2，其中，α1又分为四型。

唾液中钙以三种方式存在：钙离子、无机复合物、与有机物结合。

唾液中最常见的钙及磷酸盐是磷酸氢钙、磷酸八钙、磷酸钙、羟磷灰石。

唾液内的免疫球蛋白主要有IgA、IgG、IgM，其中分泌型IgA（SIgA）最重要。SigA一般认为是由大小涎腺的浆细胞合成。

唾液诊断口腔疾病包括：涎腺炎症、龋病、牙周病。

生物矿化的机制：成核、晶核成长、集聚、固相转换。

（大题）

【釉质中的氟】

釉质中，氟占重量的0.005%-0.5%，其表面含氟量明显高于釉牙本质界。

其影响因素为：①釉质蛋白 ②组织液 ③外环境 ④生理性磨损

【釉质的硬度和密度】

硬度：牙萌出后硬度逐渐增加，老年恒牙硬度＞年轻恒牙＞成熟乳牙＞不成熟乳牙

密度：①表面釉质密度最高，近釉牙本质界处最低 ②未萌牙的釉质密度低于已萌牙，乳牙釉质的密度低于恒牙

【牙本质和牙骨质胶原特点】

①胶原原纤维对矿物盐有较大的吸收力 ②牙本质胶原比软组织胶原稳定

【牙周组织的胶原】

在正常的牙龈结缔组织，Ⅰ型和Ⅲ型胶原是主要的胶原类型，另有少量的Ⅳ和Ⅴ型胶原。

牙周膜以Ⅰ型和Ⅲ型胶原为主，另有少量Ⅴ型胶原。牙槽骨主要为Ⅰ型胶原。牙骨质为Ⅰ型胶原和少量Ⅲ型胶原。

【牙周病变过程中胶原类型的变化】

①Ⅴ型胶原的含量明显上升 ②出现Ⅰ型胶原三聚体 ③Ⅲ型胶原含量下降

【唾液中的氟】

浓度在0.01-0.05mg/L之间。在牙萌出进一步矿化期间，唾液中的氟可以进入牙，与牙内的羟磷灰石发生置换反应，形成抗酸力强的氟磷灰石，提高牙的抗龋力。

【简述SIgA功能】

①粘膜免疫 ②抗原调节和免疫排斥 ③口腔耐受 ④IgA介导的抗原分泌

【富脯蛋白、富组蛋白、富酪蛋白的特点】

1）富脯蛋白：主要有腮腺分泌，是人类唾液中最大的一族蛋白，约占70%。根据共性可分为酸性、碱性、糖激化型三类。有多种功能：①结合钙离子 ②参与唾液获得膜的形成 ③协助细菌粘附

2）富组蛋白：一组阳离子性多功能蛋白质。具有较强抗真菌及抑制细菌作用；与羟基磷灰石有很强的亲和力，吸附于牙釉质表面，参与获得膜形成；抑制磷酸钙结晶形成。

3）富酪蛋白：由腺泡细胞分泌，是富含酪氨酸和脯氨酸的磷蛋白。在结构及生物学功能上与富脯蛋白十分相似。

【两种唾液粘蛋白MGⅠ、MGⅡ比较】

【唾液蛋白质的功能10点】

①保水作用 ②润滑作用 ③维持味觉 ④形成软组织表面膜 ⑤形成釉质获得膜 ⑥消化作用⑦软组织修复 ⑧保护和修复牙组织 ⑨调节菌斑pH ⑩抑制微生物

第三章 口腔疾病分子生物学

（名解）

复制子（replicon）：一个单独的DNA复制单位称为复制子。

复制原点：每一个复制子都含有一个复制起点序列，又称为复制原点，也常含一个末端序列，复制的过程在此终结。

半不连续复制（semidiscontinuous replication）：DNA半保留复制时，5’→3’方向的DNA合成是连续不断的，称为引导链。而3’→5’方向的合成是不连续的，称为滞后链。其过程主要是引物酶在3’→5’链上隔段合成许多RNA作为引物，随后DNA聚合酶仍以5’→3’方向合成许多DNA片段（冈崎片段）。再由DNA多聚酶Ⅰ降解RNA引物并在片段间的空隙处合成DNA，最后由DNA连接酶将各片段连接起来构成一条完整的DNA链。

RNA多聚酶：是一种复合酶，能识别DNA上特定的序列，即RNA合成起始信号。

启动子（promoter）：DNA上的特定起始序列称启动子。

内含子（intron）：即插入序列，它是位于基因的内部，能够被转录的一段DNA。但在转录之后，与之相应的那部分转录产物在拼接中被去掉了。

外显子（exon）：就是基因中与成熟的mRNA相对应的DNA片段，它不仅包括为蛋白质编码的部分，而且包括5’和3’末端不翻译的前导序列和尾随序列。

限制性内切酶（restriction endonuclease）：是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶，可分为三类。

质粒（plasmid）：是一种细菌细胞内独立于染色体外的环状DNA，它具有自我复制能力。在细胞分裂时可伴随染色体分配至子细胞中去。

转化（transformation）：是指受体菌捕获和表达质粒载体DNA分子的生命过程。

转染（transfection）：专指受体菌捕获和表达噬菌体DNA分子的过程。

转导：利用噬菌体颗粒为媒介，将外源DNA转移至受体菌并得到表达的生命过程。

（填空）

在RNA合成时，作为模板的DNA链称有意义链，非模板链则称为反义链。

质粒由以下几部分组成：ori区、par区、多克隆区、选择因子。

核酸杂交的类型有：点杂交、Southern杂交。

用于PCR的DNA多聚酶，即Taq DNA多聚酶有如下特点：热稳定性、高特异性、适宜较长DNA片段的扩增。

DNA复制的特点：半保留复制、半不连续复制。

（大题）

【DNA结构模型】

①DNA分子是互相旋转的两条长链，为一种双螺旋形式。每一条链主干由相互排列的糖和磷酸组成，两条链的极性相反，为反向平行。

②碱基不是随机配对，A只能与T配对，C只能与G配对。

【DNA多聚酶】

有三种。其中DNA多聚酶Ⅲ是DNA合成与复制中的主要合成酶。DNA多聚酶还需在下列因素的参与下方能合成DNA：①DNA的前体材料，四种脱氧核苷酸 ②镁离子的存在 ③一小段DNA或RNA引物 ④一个DNA模板

【中心法则】

①物种的多样化是由DNA决定的。DNA可进行自我复制并将复制的遗传信息传递给子代，使物种维持高度稳定。

②以DNA序列为模板，“复制”多套mRNA用于蛋白质合成。

③以mRNA序列为氨基酸装配蓝图，合成特定蛋白质，通过后者展示出丰富多彩的生命。

【Ⅱ型限制性内切酶3特征】

①有特定的识别序列，通常为4-6个碱基对。

②切割点位于识别序列内的固定位置上。

③酶切后形成粘性末端或平齐末端。

【核酸分子杂交的原理】

在一定条件下（温度、pH值等）DNA双股螺旋可解开并分离。两股游离的互补核苷酸可自行配对形成双链，而形成双链的两条DNA单链来自不同的生物有机体。

【PCR的原理】

DNA的合成是以一股DNA单链为模板，在引物的存在下，DNA多聚酶沿模板以5'→3'方向延伸引物的过程。PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。

包括三个步骤：①DNA变性 ②引物与靶DNA退火 ③引物延伸

【釉基质蛋白在釉质发育中的作用】

①启动釉质矿化 ②作为晶体生长的支持相 ③调节晶体生长

【牙本质有机物的分类】

第五章 口腔骨组织生物学

（名解）

束状骨（bundle bone）：含穿通纤维的骨板称为束状骨。

（填空）

牙周膜中存在多种胶原，目前已发现Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ型。

牙周膜中的重要细胞成分有：成纤维细胞、未分化干细胞。

骨基质中的其他成分有：骨钙素、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨粘连蛋白、生长因子、骨形成蛋白。

成骨细胞分化成熟分为四个阶段：前成骨细胞、成骨细胞、骨细胞、骨衬里细胞。

组化染色成骨细胞碱性磷酸酶呈强阳性。

骨钙素是骨基质中主要的非胶原蛋白，目前认为是成骨细胞最晚表达的一个标志。

（大题）

【牙槽骨的生物特征】

①70%为矿化物质，22%为蛋白质，8%为水分。有机基质中95%为Ⅰ型胶原，另外5%由蛋白糖原和多种非胶原蛋白构成。在细胞控制下，骨的有机基质由羟基磷灰石的形式沉积。

②骨的形态分为密质骨和松质骨。

③牙槽骨是高度可塑性组织，也是全身骨骼中变化最活跃的部分，受压力侧牙槽骨骨质吸收，牵张侧牙槽骨骨质增。

【骨改建的细胞学基础】

骨组织由四种细胞构成：成骨细胞、破骨细胞、骨衬里细胞、骨细胞。成骨细胞、破骨细胞、骨衬里细胞都存在于骨的表面，而骨细胞则被包埋在钙化的骨基质中。成骨细胞、骨衬里细胞、骨细胞都来源于局部骨组织，而破骨细胞则是由造血组织中的单核细胞融合而成，随血流到达骨改建部位。

【破骨细胞的功能（3点）！！！！】

破骨细胞的主要功能是吸收骨、牙本质和钙化的软骨，是目前发现行使骨吸收功能的唯一细胞。

①破骨细胞的骨吸收过程：与骨表面附着→细胞极性化→形成封闭区→形成骨吸收陷窝→脱离骨面转移到下一个吸收表面或细胞死亡。

电镜下，破骨细胞有两个与其骨吸收功能密切相关的独特结构，即皱褶缘（ruffled border）和清晰区（clear zone）。皱褶缘邻近骨陷窝面，为胞膜高度皱褶形成的区域，突起的远端膨大、伸长。皱褶缘处的胞膜上存在特殊的结构如质子泵（proton pump），可以在此进行特殊的物质交换。皱褶缘为行使骨吸收功能的破骨细胞所特有，当破骨细胞离开骨表面，这一形态就消失。其意义在于扩大了破骨细胞与骨接触的面积，并且在该处进行物质交换。

封闭区胞膜上存在特殊的蛋白质结构，为骨基质蛋白的受体，称之为整合素（lntegrin）。

②破骨细胞对矿物质的降解：只有低pH状态可以溶解羟基磷灰石。骨陷窝的微环境在骨吸收开始时，是通过破骨细胞内的酸性分泌小泡不断与皱褶缘的胞膜融合，同时将胞内酸性物质分泌到骨陷窝内造成的。

③破骨细胞对骨基质中有机质的降解：骨基质中有机质的降解主要通过溶酶体半胱氨酸蛋白酶和金属蛋白酶（MMPs）进行。成骨细胞可以分泌MMP-1（胶原酶）降解骨表面的类骨质。

【破骨细胞的鉴定标准3点】

①细胞表面降钙素受体阳性

②抗酒石酸磷酸酶染色阳性

③可以在骨表面形成骨吸收陷窝

【成骨细胞与破骨细胞的关系3点】

①成骨细胞参与破骨细胞在骨表面附着的调节

②成骨细胞合成破骨细胞骨吸收刺激因子

③成骨细胞参与破骨细胞分化成熟的调节

【各种骨的细胞培养】

①骨髓细胞培养

②牙本质表面观察混合骨细胞培养中破骨细胞的生成及其功能

③成骨细胞的体外培养

第六章 口腔细胞培养及其应用

（名解）

细胞培养：就是模拟体内的生理环境，在适当的条件下，使活体组织细胞在体外环境存活、生长增殖，并维持其结构功能。它是指从体内取出组织模仿体内生理环境，在无菌、适当温度和一定营养条件下使其生存生长并维持结构和功能的方法。

贴壁型细胞：这类细胞在培养时能贴附在支持物表面生长。

细胞“一代”：仅指从细胞接种到分离再培养时的一段时间。

指数生长期：这是细胞增殖最旺盛的阶段，细胞分裂相增多。指数生长期细胞分裂相数量可作为判定细胞生长旺盛与否的一个重要标志。

（填空）

细胞培养的体外生长环境：无污染环境、基质、气体环境和氢离子浓度、液相环境。

口腔组织特有的干细胞：牙髓干细胞、脱落乳牙牙髓干细胞、牙周膜干细胞、根尖牙乳头干细胞、唾液腺干细胞

（大题）

【组织培养细胞生命期】

①原代培养期：也称初代培养，即从体内取出组织接种到第一次传代阶段，一般持续1-4周。此期可见细胞分裂，但不旺盛。

②传代期：初代培养细胞一经传代后称作细胞系。一般情况下当传代30-50次后，细胞增殖逐渐缓慢，以致完全停止，细胞进入第三期。

③衰退期：此期细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；细胞形态轮廓增强，最后衰退凋亡。

【天然培养基、合成培养基】

①天然培养基：以天然成分作为培养液。包括血清、组织提取液、水解乳白蛋白等。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，缺点是成分复杂，来源受限。

②合成培养基：根据人和动物体内细胞所需成分模拟合成的，配方恒定的一种较理想的培养基。主要成分包括氨基酸、维生素、糖类、无机离子和一些其他辅助物质。

【组织工程的基本原理】

组织工程学的基本原理和方法是从机体获得少量的活体组织，用特殊酶或其他方法浆细胞从组织中分离出来并在体外进行培养扩增，然后将扩增的细胞与具有良好生物相容性、可降解和可吸收的生物材料按一定的比例混合，使细胞粘附在生物材料上形成细胞-材料复合物，将该复合物植入机体的组织或器官的病损部位，随着生物材料在体内逐渐被讲解和吸收，植入的细胞在体内不断增值并分泌细胞外基质，最终形成相应的组织或器官，从而达到修复创伤和重建功能的目的。

【组织工程支架材料须符合以下要求】

①具有良好的生物相容性 ②具有生物可降解性③具有良好的表面活性 ④具有多孔性

⑤具有可塑性

【组织工程学在口腔医学中的应用】

①组织工程学在颌面重建中的作用

②组织工程学在引导口腔组织再生中的作用

③组织工程化黏膜在口腔医学中的应用

④组织工程用于人造涎腺的初步研究

⑤牙组织工程