3、见2019年简答

4、（1）底物专一性：酶对底物的专一性包括结构专一性和立体异构专一性，作用机制是诱导契合假说，即当酶分子与底物分子接近时，酶蛋白受到底物分子的诱导，其构象发生有利于底物结合的变化，酶与底物再此基础上互补契合进行反应。

（2）反应高效率：使酶催化高效的因素主要有：

①邻近效应与定向效应：邻近效应指酶与底物结合形成中间复合物以后，使底物和底物之间，酶的催化基团与底物之间结合于同一分子而使有效浓度得以极大升高，从而使反应速度大大增加的一种效应；定向效应：指反应物的反应基团之间和酶的催化基团与底物的反应基团之间的正确取位产生的效应。

②酸碱催化：酸碱催化是通过瞬时的向反应物提供质子或从反应物接受质子以稳定过渡态，加速反应的一类催化机制

③共价催化：共价催化又称亲核催化或亲电子催化，在催化时，亲核催化剂或亲电子催化剂能分别放出或汲取电子并作用于底物的缺电子中心或负电中心，迅速形成不稳定的共价中间复合物，降低反应活化能，使反应加速

④金属离子催化：金属离子主要通过3种途径参与催化：a、通过结合底物为反应定向b、通过可逆的调节金属离子的氧化态调节氧化还原反应c、通过静电稳定或屏蔽负电荷

⑤多元催化和协同效应：酶催化反应中，常常是几个基元反应配合在一起共同起作用，这种多元催化协同作用的结果，是使酶反应加速的一个因素

⑥活性部位微环境：活性部位一般位于酶分子疏水环境的裂缝中，这种环境中底物分子与催化基团之间多用比在极性环境中强的多，大大有利于酶的催化作用。

5、（1）原理：将不同来源的DNA放在试管里，经热变性后，慢慢冷却，让其复性。若这些DNA之间在某些区域有相同的序列 ，复性时，会形成杂交DNA分子。

（2）将DNA样品经限制性内切酶降解后，用琼脂糖凝胶电泳进行分离。将胶浸泡在碱溶液中使DNA变性，然后将变性DNA转移到硝酸纤维素膜上，在80℃焙烤4到6小时，使DNA牢固的吸附在硝酸纤维素膜上，然后与放射性同位素标记的变性DNA探针进行杂交，杂交须在较高的盐浓度及适当的温度下进行数小时或十余小时，然后通过洗涤，除去未杂交上的标记物，将硝酸纤维素膜烘干后进行放射自显影

6、人体内脂肪酸是很难转变为葡萄糖的。因为脂肪酸通过β氧化生成乙酰辅酶A，在植物体内可以通过乙醛酸循环转变为三羧酸循环中的有机酸，如草酰乙酸，然后生成丙酮酸，糖异生形成葡萄糖，而在动物体内，由于没有乙醛酸循环，乙酰辅酶A一般都是经三羧酸循环氧化生成二氧化碳和水，生糖的机会很少

2019年

一、    填空题

1、1.5  2.5    2、A位点  P位点    3、脲    4、苯丙氨酸（Phe）  酪氨酸（Tyr）

5、天冬酰胺  丝氨酸  苏氨酸    6、糖类（一类非抗体的蛋白质或糖蛋白，它能专一的与细胞表面的糖类非共价结合，并具有凝集细胞和沉淀聚糖和复合糖的作用）  

7、己糖激酶  磷酸果糖激酶  丙酮酸激酶  柠檬酸合酶  异柠檬酸脱氢酶  α—酮戊二酸脱氢酶    8、2nm  0.34nm  10  A、C、D、E、Z    9、2  25  32

二、判断题

1、氨基酸与茚三酮反应均生成颜色反应，是鉴定氨基酸的特征反应

2、二硫键对于稳定蛋白质的三级结构具有重要的作用，二硫键的位置属于三级结构范畴

3、所有的酶蛋白都是球状蛋白（X？）

4、将某种氨基酸溶于水所得溶液PH为9，则该氨基酸的等电点大于9

5、限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶

6、维生素B12的分子结构中含有钴元素

7、竞争性抑制使酶对底物的Km变大

8、构成生物膜的脂质、蛋白质、糖类在膜两侧的分布都是不均匀的

9、真核生物成熟的mRNA有帽子和尾巴结构

10、若DNA双链之一股是pGpTpGpGpApC,则其互补链是pCpApCpCpTpG

11、在大肠杆菌中转录和翻译几乎是同时进行的

12、脂双层膜对一些小分子，如水分子以及各种离子是允许自由通过的（X）

13、DNA复制时，岗崎片段的合成需要RNA引物

14、操纵子模型是由Monod和Jacob两位科学家提出的

15、Southern blot、Nothern blot、Western blot分别是DNA、RNA和蛋白质进行印记转移的技术

四、名词解释

1、等电点：氨基酸净电荷为0时的PH称为等电点，即PI

2、双螺旋结构：

3、核酶：具有催化活性的RNA称为核酶

4、Tm值：把加热变性使DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的熔点或熔解温度，即Tm

5、操纵子：指细菌基因表达核调控单位，它包括结构基因、调节基因和由调节基因产物所识别的控制序列

6、Pribnow box：大肠杆菌RNA合成时，起点上游约—10处有6bp的保守序列TATAAT，称为Pribnow 框，即Pribnow box，又称—10序列

7、排阻层析：（凝胶过滤层析）是根据分子大小进行分离的技术，不同大小的分子受到的排阻不同，最终按照分子大小从小到大的顺序流出

8、岗崎片段：见2019年名词解释

9、协同效应：

10、级联放大效应：机体调节代谢过程中，少量的物质，到最后却引起了极强烈的效应，反应过程中各个信号放大了数百万倍，这种作用称为级联放大效应

11、酵解途径：无氧条件下，葡萄糖进行分解，形成2分子丙酮酸并提供能量，这一个过程为糖酵解作用，即酵解途径

12、电子传递链：电子从NADH到O2的传递所经过的途径形象的称为电子传递链，或称呼吸链

13、脂质体：见2019年名词解释

14、第二信使：激素调节过程中，cAMP起着信息的传递和放大作用，激素这样作用方式称为第二信使学说，cAMP即为第二信使

15、端粒酶：是一种反转录酶，它以RNA为模板来合成DNA的端粒结构

五、问答题

1、乳糖操纵子包括启动子、操纵基因和三个结构基因（分别编码分解乳糖所需要的3种酶），乳糖操纵子的操纵基因lacO不编码任何蛋白质，它是另一位点上调节基因lacI所编码的阻遏蛋白的结合部位，阻遏蛋白是一种变构蛋白，当细胞中有乳糖或其他诱导物的情况下阻遏蛋白便和他们结合，结果使阻遏蛋白的构象发生了改变而不能结合到lacO上，于是转录便得以进行，从而使吸收和分解乳糖的酶被诱导产生。如果细胞中没有乳糖或其他诱导物则阻遏蛋白就结合在lacO上，阻止了结合在启动子P上的RNA聚合酶向前移动，使转录不能进行

2、（1）糖先在细胞溶胶中经糖酵解途径转化为丙酮酸，随后丙酮酸进入线粒体脱氢形成乙酰辅酶A，经过三羧酸循环彻底氧生成二氧化碳和水。另外，糖酵解产生的丙酮酸还可在无氧条件下转化为乳酸。

（2）脂肪在体内先转变为脂肪酸，然后活化称脂酰辅酶A，进入线粒体进行β氧化生成乙酰辅酶A，进入三羧酸循环

（3）蛋白质水解为氨基酸后经过转氨基、脱氨基作用，N经尿素循环最后形成尿素排除体外，而碳骨架则以各种形式进入三羧酸循环

（4）相互联系：

A、糖与蛋白质：①糖分解代谢过程中产生的丙酮酸经TCA循环转变为草酰乙酸、α—酮戊二酸等可用于合成各种氨基酸的碳链结构，经氨基化活转氨基后即生成相应的氨基酸，另外糖分解产生的能量也可供氨基酸合成蛋白质用②蛋白质分解为氨基酸脱氨基后形成α—酮戊二酸、丙酮酸、草酰乙酸、琥珀酸可形成葡萄糖和糖原

B、脂和蛋白质：①脂类分子中的甘油可以经丙酮酸转变为草酰乙酸、α—酮戊二酸进而变为氨基酸。而脂肪酸β氧化产生的乙酰辅酶A在动物体内由于没有乙醛酸循环不易被利用合成氨基酸②蛋白质分解产生的生酮氨基酸可形成乙酰乙酸，从而合成脂肪，而生糖氨基酸可通过丙酮酸变为甘油，也可形成乙酰辅酶A，经丙二酰合成脂肪

C、糖和脂：①糖经酵解生成二羟丙酮磷酸和丙酮酸，前者合成甘油，后者可以再形成乙酰辅酶A，然后缩合形成脂肪酸②脂肪分解产生的甘油可转变为二羟丙酮磷酸，从而生成糖，而脂肪酸β氧化产生的乙酰辅酶A由于再动物体内酶有乙醛酸循环，一般都经TCA循环氧化成二氧化碳和水，生糖的机会很少

2019年

一、    填空题

1、10.56    2、D  7—脱氢胆甾醇    3、竞争性抑制  非竞争性抑制    4、32  106

5、解偶联    6、丙酮  乙酰乙酸  D—β—羟丁酸  7、磷酸戊糖    8、2  0.34  10  A    9、40  60  40    10、聚合酶  5’→3’核酸外切酶  3’→5’核酸外切酶

二、判断题

1、IEF是根据蛋白子分子的等电点的一种高分辨率的蛋白分离技术，也可用于蛋白质等电点的测定，从广义上说是一种自由界面电泳

2、多肽链中Pro出现的地方会引起螺旋型构象的中断

3、所有酶蛋白都是球状蛋白（X）？

4、氨基酸中除Pro外与茚三酮反应均生成紫色，是鉴定氨基酸的特征反应

5、葡萄糖激酶不是己糖激酶

6、别构一般都是寡聚酶

7、二硫键对于稳定蛋白质的三级结构具有重要意义

8、在大肠杆菌中转录和翻译几乎同时进行

9、所有酶都是蛋白质（X）

三、名词解释

1、凯氏定氮法：根据氮在蛋白质中的百分比为16%，测定蛋白质总量的一种经典方法

2、抗体酶：是一种具有催化能力的蛋白质，其本质上是免疫球蛋白，但是在易变区被赋予了酶的属性，又称催化性抗体

3、中心法则：即遗传信息从DNA传到RNA，再传到蛋白质，一旦传给蛋白质就不再转移

4、化学渗透学说：见2019年简答  

5、外显子：真核生物的基因通常都是断裂的，保留再成熟RNA中的编码序列称为外显子

6、端粒酶：是一种反转录酶，它以RNA为模板来合成DNA的端粒结构

7、氧化磷酸化：见2019年名词解释

8、限制性内切酶：是细胞内能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶

9、流动镶嵌模型：是生物膜分子结构的一种模型，认为膜是由脂质和蛋白质分子按二维排列的流体，并且脂质、蛋白质、糖类在膜两侧分布是不均匀的

10、分子筛层析：

四、问答题

1、所谓操纵子即基因表达的协调单位，它们有共同的控制区和调节系统，包括在功能上彼此相关的结构基因和控制部位，后者由启动子和操纵基因所组成。一个操纵子的全部基因排列在一起，其中虽然包括若干个结构基因，可是通过转录形成的却是一条多顺反子mRNA，操纵子中的控制部位可接受调节基因产物（多为负调节因子）的调节

2、（1）先将动物组织剔除结缔组织和脂肪组织

（2）用电动捣碎机对材料进行细胞破碎

（3）选用适当的缓冲液把所需要的蛋白质提取处来

（4）用盐析、或等电点沉淀等方法进行粗分级分离

（5）再用凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析等层析方法进行细分级分离

（6）将细分级分离得到的产品进行结晶

3、（1）DNA克隆：是使用限制性内切酶将所需要的DNA片段切割下来，再用DNA连接酶插入到带由标记基因的载体中，导入宿主细胞内，经过无性繁殖，获得相同的DNA扩增分子。这种技术主要用于获得特定的DNA序列的扩增，应用于基因文库的构建、构建工程疫苗