（2）PCR：聚合酶链式反，又称无细胞分子克隆法。其原理是：首先使DNA热变性，双链解开，然后使引物模板退火，然后DNA聚合酶随即以4中dNTP为底物，在引物的引导下合成与模板互补的DNA新链，重复此过程，DNA以指数方式扩增。这种技术是获得大量特定DNA扩增的方法，主要用于DNA的测序、合成特异探针、产生和分析基因突变、基因组序列的比较研究，还广泛的应用到了临床医学和法医学中

4、一分子三软脂肪酸甘油分解称3分子软脂酸和1分子甘油

（1）1分子甘油转变为1分子丙酮酸，进入糖代谢：

丙酮酸氧化脱羧形成乙酰辅酶A                    1NADH=2.5ATP

异柠檬酸氧化                                    1NADH=2.5ATP

α—酮戊二酸氧化                                1NADH=2.5ATP

琥珀酰辅酶A转化为琥珀酸                        1GTP=1ATP

琥珀酸氧化                                      1FADH2=1.5ATP

苹果酸氧化                                      1NADH=2.5ATP

即1分子甘油转变为1分子丙酮酸生成12.5个ATP

（2）1分子软脂酸经活化消耗2个高能磷酸键进入线粒体发生β氧化生成8分子乙酰辅酶A、7分子NADH和7分子FADH2。由（1）知1分子乙酰辅酶A生成10个ATP，故1分子软脂酸产生的ATP数为：8（乙酰辅酶A）*10+7（NADH）*2.5+7（FADH2）*1.5=108个，因为软脂酸活化时消耗了2个高能磷酸键，所以净生成了106个ATP

综上：1分子三软脂酸甘油完全氧化生成ATP个数为：

12.5+106*3=330.5个

2019年

一、    填空题

1、3.22  正  酸性    2、竞争性抑制  非竞争性抑制  反竞争性抑制  增大  不变  减小    3、己糖激酶  磷酸果糖激酶  丙酮酸激酶  柠檬酸合酶  异柠檬酸脱氢酶  α—酮戊二酸脱氢酶    4、3.6  0.54  Pro    5、2  32    6、氧化磷酸化  底物水平的磷酸化

二、名词解释

1、Tm值：见2019年名词解释

2、中间产物学说：

3、中心法则：即遗传信息从DNA传到RNA，再传到蛋白质，一旦传给蛋白质就不再转移

4、凯氏定氮法：根据氮在蛋白质中的百分比为16%，测定蛋白质总量的一种经典方法

5、超二级结构：见2019年简答题

6、电子传递链：见2019年名词解释

7、PCR：见2019年名词解释

8、启动子：是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列

9、糖异生：指以非糖物质作为前体合成葡萄糖的作用

10、多聚核糖体：通常，1个mRNA分子上可结合有多个不同时间开始翻译的核糖体，这样的结构称为多聚核糖体

三、问答题

1、（1）蛋白质的一级结构：只指多肽链中的氨基酸序列

（2）蛋白质的二级结构：蛋白质主链的折叠产生的由氢键维系的有规则的构象称二级结构

（3）蛋白质的三级结构：指由二级结构元件构建成的总三维结构，包括一级结构中相距远的肽段之间的几何相互关系和侧链在三维空间中彼此的相互关系

（4）蛋白质的四级结构：自然界中很多蛋白是以独立折叠的球状蛋白质的聚集体形式存在，这些球状蛋白质通过非共价键彼此缔合在一起，缔合形成聚集体的方式构成就蛋白质的四级结构

2、（1）过程：①活化②氧化③水合④氧化⑤裂解，其中后四步构成循环，每次脱下1个乙酰辅酶A

（2）ATP：见2019年简答题

3、（1）磷酸戊糖途径：发生在细胞溶胶，又称戊糖支路、己糖单磷酸途径等，这些名称都强调的是从磷酸化的六碳糖形成磷酸化的五碳糖，同时还生成NADPH，可划分为两个阶段：①氧化阶段②非氧化阶段

（2）生理意义：①磷酸戊糖途径是细胞产生还原力（NADPH）主要途径

②磷酸戊糖途径是细胞内不同结构糖分子的重要来源，并为各种单糖的相互转化提供条件

4、见2019年简答题

5、胰蛋白酶水解碱性氨基酸Arg、Lys羰基端侧链，胰凝乳蛋白酶水解芳香族氨基酸Phe、Tyr羰基端侧链。二硝基氟苯（DNFB、FDNB）法，用于蛋白质N末端分析，只有N末端氨基酸可与之反应生成黄色DNP—氨基酸，故此8肽为：

Ala—Ser—Lys—Phe—Gly—Lys—Tyr—Asp

6、（1）假说：见2019年简答

（2）缺陷：偶联的具体分子机制尚未能完全阐明，如H+究竟是怎样通过电子传递而被逐出的

（3）想法：①氧化还原回路机制：各个氧化还原中心既能执行电子转移又能执行质子转移，前一个氧化还原中心被后一个氧化还原中心氧化，并伴随质子的转移

②质子泵机制：电子传递导致复合体构象变化，构象的变化使发挥质子泵作用的侧链暴露在外，并交替的暴露在线粒体内膜的内侧和外侧，使质子移位

2000年

一、    填空题

1、D  7—脱氢胆甾醇    2、竞争性抑制  非竞争性抑制    3、磷酸戊糖途径    4、32  106    5、16%  凯氏定氮法    6、10.56    7、脯氨酸    8、聚合酶  5’→3’核酸外切酶  3’→5’核酸外切酶    9、亲和力    10、双缩尿反应    11、2nm  0.34nm  10  A

二、判断题

1、氨基酸与茚三酮反应均生成颜色反应，是鉴定氨基酸的特征反应

2、限制性内切酶是能识别特定核苷酸序列的核酸内切酶

3、磷脂双分子层构成生物膜的基本骨架

4、辅酶NADH和NADPH所携带的H去向是不同的

5、葡萄糖激酶不是己糖激酶

6、别构酶一般都是寡聚酶

7、脂肪酸β氧化从羧基端开始，ω氧化从碳端也可以氧化

8、二硫键对于稳定蛋白质的三级结构具有重要作用

9、若DNA双链之一是pGpTpGpGpApC，则其互补链是pCpApCpCpTpG

10、在大肠杆菌中转录和翻译几乎是同时进行的

三、名词解释

1、结构域：多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成的三级结构的局部折叠，它是相对紧密的球状实体，称为结构域

2、岗崎片段：见2019年名词解释

3、PCR：见2019年名词解释

4、多酶体系：由几种酶靠非共价键彼此嵌合而形成的体系

5、别构效应：见2019年名词解释

6、操纵子：见2019年名词解释

7、酸败：天然油脂长期暴露在空气中会产生难闻的气味，这种现象称为酸败

8、酵解：见2019年名词解释

9、电子传递链：见2019年名词解释

10、排阻层析：见2019年名词解释

五、简答

1、（1）蛋白质的一级结构：只指多肽链中的氨基酸序列

（2）蛋白质的二级结构：蛋白质主链的折叠产生的由氢键维系的有规则的构象称二级结构

（3）蛋白质的三级结构：指由二级结构元件构建成的总三维结构，包括一级结构中相距远的肽段之间的几何相互关系和侧链在三维空间中彼此的相互关系

（4）蛋白质的四级结构：自然界中很多蛋白是以独立折叠的球状蛋白质的聚集体形式存在，这些球状蛋白质通过非共价键彼此缔合在一起，缔合形成聚集体的方式构成就蛋白质的四级结构。

2、（1）酮体：是在肝脏中由乙酰辅酶A转化而来的，包括乙酰乙酸、丙酮、D—β—羟丁酸

（2）生理意义：在肝外组织中D—β—羟丁酸被D—β—羟丁酸脱氢酶催化生成乙酰乙酸，进而形成2分子乙酰辅酶A进行供能。

3、真核生物核糖体由40S亚基和60S亚基构成，原核生物核糖体由30S亚基和50S亚基构成，真核生物核糖体蛋白质分子数较原核生物要多。

4、见2019年简答

5、见2019年简答

六、问答

1、1分子17碳饱和脂肪酸甘油分解为1分子甘油和3分子17碳饱和脂肪酸

（1）1分子甘油甘油：见2019年简答

（2）1分子17碳饱和脂肪酸氧化生成7分子乙酰辅酶A、1分子丙酰辅酶A、7分子NADH、7分子FADH2。1分子丙酰辅酶A消耗1分子ATP转变为琥珀酰辅酶A，琥珀酰辅酶A氧化生成1分子GTP、1分子NADH、1分子FADH2

其他见2019年简答

2、这种观点是由一定的科学道理的，首先RNA具有5类功能：（1）控制蛋白质合成（2）作用于RNA转录后加工与修饰（3）基因表达与细胞功能的调节（4）生物催化与其他细胞持家功能（5）遗传信息的加工与进化。如果说生物大分子的合成在一定程度上反映了它们的演化历史，那么RNA就是具有最复杂演化历史的生物大分子，也很有可能是最早的生物大分子，因为它的转录后加工远比任何以类大分子合成后的加工都要复杂

3、见2019年简答

2019年

一、    填空题

1、16    2、α—螺旋  β—折叠  β—转角    3、4  血红素（Hb，铁的微小移动导致构象的转变）    4、激  磷酸    5、亚油酸  亚麻酸    6、生长素  乙烯  

7、己糖激酶  磷酸果糖激酶  丙酮酸激酶    8、1.5  2.5    9、3  1  2  9  

10、30  50    11、肌球蛋白（动力）  肌动蛋白（轨道）

二、判断题

1、组成蛋白的20种氨基酸，除甘氨酸外都有旋光性

2、酶的抑制剂可引起酶活力下降或消失，但并不引起酶变性

3、镰刀型细胞贫血症是一种先天性的疾病，其病因是由于正常血红蛋白分子中的一个Glu残基被Val残基取代

4、辅酶与辅基的区别只在于它们与蛋白质结合的牢固程度不同，并没有严格的界限

7、几丁质是N—乙酰—D—葡萄糖胺以β（1→4）糖苷键构成的均一多糖

8、构成萜类化合物的基本成分是异戊二烯分子（类固醇也成甾类，以环戊烷多氢菲为基础）